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    2．将动物致病菌的抗原基因导入马铃薯制成植物疫苗，饲喂转基因马铃薯可使动物获得免疫力．以下是与植物疫苗制备过程相关的图和表．

    表1 引物对序列表
    引物对AP1 AACTGAAATGTAGCTATC
    引物对BP2 TTAAGTCCATTACTCTAG
    表2 几种限制酶识别序列及切割位点表
    限制酶AluⅠEcoRⅠPstⅠSmaⅠ
    切割位点AG↓CT
    TC↑GA    		G↓AATTC
    CTTAA↑G    		CTGCA↓G
    G↑ACGTC    		CCC↓GGG
    GGG↑CCC
    请根据以图表回答下列问题．
    （1）在采用常规PCR方法扩增目的基因的过程中，使用的DNA聚合酶不同于一般生物体内的DNA聚合酶，其最主要的特点是耐高温．
    （2）PCR过程中退火（复性）温度必须根据引物的碱基数量和种类来设定．表1根据模板设计的两对引物序列，图2为引物对与模板结合示意图．请判断哪一对引物可采用较高的退火温度引物对B．
    （3）目的基因插入质粒后，不能影响质粒的复制．载体构建过程需要的工具酶为限制酶和连接酶
    （4）图1步骤3所用的DNA连接酶对所连接的DNA两端碱基序列是否有专一性要求否
    （5）为将外源基因转入马铃薯，图1步骤6转基因所用的细菌B通常为农杆菌．
    （6）对符合设计要求的重组质粒T进行酶切，假设所用的酶均可将识别位点完全切开，请根据图1中标示的酶切位点和表2所列的识别序列，对以下酶切结果作出判断．
    ①采用EcoRI和PstI酶切，得到2种DNA片断．
    ②采用EcoRI和SmaI酶切，得到1种DNA片段．

    分析 PCR技术是在体外对DNA进行扩增，所用的DNA聚合酶与体内DNA聚合酶不同，是耐高温的DNA聚合酶，过程为变性使DNA分子两条链鈖旋开来，复性是让引物与DNA解旋开来的单链互补配对，延伸是在DNA聚合酶的作用在引物引导下合成子代DNA分子．耐高温的DNA分子中通常含有G与C碱基比例大，因为它们之间形成三个氢键，而A与T之间只有两个氢键．

    解答 解：（1）PCR方法扩增目的基因的过程中，需要进行高温解链过程，因此使用的DNA聚合酶要具有耐高温的特性．
    （2）耐高温的DNA分子中通常含有G与C碱基比例大，因为它们之间形成三个氢键，稳定性强．引物B中含C与G的碱基对较多，可采用较高的退火温度．
    （3）
    （4）多种限制酶切割，形成不同的切割位点，所用的DNA连接酶对所连接的DNA两端碱基序列就没有专一性要求．
    （4）植物基因工程中，将目的基因导入受体细胞常用农杆菌转化法，因此常用农杆菌做受体细胞．
    （5）据图分析，用到了EcoR I酶和Alu I酶切割抗原DNA片段产生了X、Y两个片段，而用EcoR I酶和SmaI酶切割质粒产生了 M、N两个片段，且M、N片段间存在Pst I酶切点．因此再用EcoRⅠ和PstⅠ酶切割这两片段形成的重组质粒，由于保留了Pstl的切割位点，所以可以得到两种DNA分子，而用EcoRⅠ和SmaⅠ酶切重组质粒中，只能产生一种DNA片断．
    故答案为：
    （1）耐高温  
    （2）引物对B  
    （3）复制 限制酶 连接酶  
    （4）否    
    （5）农杆菌    
    （6）①2  ②1

    点评 本题具有一定的难度，考查了运用PCR方法扩增目的基因的有关知识，意在考查考生的图解识别能力，尤其是限制酶的作用是解答本题的难点和关键点；能够识记PCR技术中DNA聚合酶耐高温的特点；识记DNA分子中C-G碱基对稳定强．

    练习册系列答案
    年级 高中课程 年级 初中课程
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    相关习题

    科目：高中生物 来源：2016届安徽合肥第八中学高三上学期第一次段考试生物试卷（解析版） 题型：选择题

    下列关于动植物细胞的结构与功能的叙述，正确的是

    A．包括核糖体和线粒体的膜结构在内，动植物细胞具有完整的生物膜系统

    B．动植物细胞都以DNA为遗传物质，以ATP为生命活动的直接能源物质

    C．植物细胞与动物细胞的最外层不同，因而两者生命系统的边界也不同

    D．动植物细胞的代谢均需要相关激素的调节，且激素的受体均位于细胞膜上

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    科目：高中生物 来源： 题型：解答题

    15．如图为正常人体内组织细胞与内环境之间物质交换示意图．其中
    ①②③④分别表示体液成分．a、b、c、d、e表示物质运输途径．
    （1）人体内的化学反应主要发生在①②③④中的③； 如果蛋白质摄入不足或④回流受阻，都会导致组织水肿（组织液增多）．
    （2）如果③为骨骼肌细胞，当人体剧烈运动时，通过HCO3-
    （物质）的调节作用，①中的pH值基本不变．
    （3）如果③为肝细胞，当正常人摄入高糖食物后，①中由胰岛B细胞分泌的胰岛素含量上升，胰岛B细胞合成并分泌该物质时，需要细胞的哪些结构参与？核糖体、内质网、高尔基体、线粒体、细胞膜．在该物质调节下，通过a、e途径的葡萄糖大于（大于、等于、小于）b、d途径．
    （4）当①中水分减少时，其浓度改变会刺激下丘脑渗透压感受器兴奋，最终使垂体释放抗利尿激素，促进对肾小管和集合管水分的重新吸收，使尿量减少，以维持内环境水的平衡．

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    科目：高中生物 来源： 题型：选择题

    12．下表比较了植物体细胞杂交和动物细胞融合的有关内容，其中不正确的有（　　）
    类别植物体细胞杂交动物细胞融合
    基本原理细胞膜的流动性、细胞的全能性细胞膜的流动性、细胞的全能性
    融合方法物理方法、化学方法物理方法、化学方法、生物方法
    典型应用杂种植物单克隆抗体的制备
    培养基
    区别    		葡萄糖可为离体组织提供营养和调节渗透压动物血清不可缺少
    A．0处B．1处C．2处D．3处

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    科目：高中生物 来源： 题型：解答题

    18．如图表示高等生物细胞有氧呼吸过程的图解，据图回答：
    （1）④、⑤、⑥代表能量，其中最多的代号是⑥．
    （2）请写出①所代表的物质名称丙酮酸．
    （3）[H]与O2结合生成②的过程，发生的场所是线粒体内膜．
    （4）如果O2供应不足，则人体内C6H12O6的分解产物是乳酸，反应场所是细胞质基质．

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    科目：高中生物 来源： 题型：选择题

    7．下列这些行为，我们应该支持的是（　　）
    A．对流感病毒基因进行改造，以使具有某种易感基因的民族感染这种病毒，而施放国的人却不易感染
    B．在任何情况下不发展、不生产、不储存生物武器，反对生物武器及其技术和设备的扩散
    C．用重组技术制造全新的致病菌
    D．将蜡状杆菌改造成像炭疽杆菌那样的致病菌

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    科目：高中生物 来源： 题型：选择题

    14．下列有关生物体内信息分子作用部位的叙述中，正确的是（　　）
    A．小肠黏膜产生促胰液素，通过体液的传送可作用于胰岛细胞
    B．突触前膜释放神经递质，可以作用于肌肉和某些腺体
    C．下丘脑产生的激素可作用于甲状腺，后者分泌的激素也可作用于下丘脑
    D．甲状腺激素不能作用于甲状腺细胞

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    科目：高中生物 来源： 题型：解答题

    11．临床使用抗生素前，有时需要做细菌耐药实验．实验时，首先要从病人身上获取少量样本，然后按照一定的实验步骤操作，以确定某致病菌对不同抗生素的敏感性．回答下列问题：
    （1）为了从样本中获取致病菌单菌落，可用划线法或稀释涂布（或涂布）法将样本接种于固体培养基表面，经过选择培养、鉴别等步骤获得．
    （2）取该单菌落适当稀释，用涂布法接种于培养基表面，在37℃培养箱中培养24h，使其均匀生长，布满平板．
    （3）为了检测该致病菌对于抗生素的敏感性，将分别含有A、B、C、D四种抗生素的滤纸片均匀置于该平板上的不同位置，培养一段时间后，含A的滤纸片周围出现透明圈，说明该致病菌对抗生素A敏感；含B的滤纸片周围没有出现透明圈，说明该致病菌对抗生素B不敏感；含C的滤纸片周围的透明圈比含A的小，说明该致病菌对C的敏感性比对A的弱；含D的滤纸片周围的透明圈也比含A的小，且透明圈中出现了一个菌落，在排除杂菌污染的情况下，此菌落很可能是抗生素D的耐药菌．
    （4）根据上述实验结果，为达到抗菌目的，最好应选用抗生素A．

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    科目：高中生物 来源： 题型：解答题

    12．血糖平衡是人体进行正常生命活动的前提，请分析回答下列有关血糖调节的问题：
    （1）人体感染某病毒时，胰岛B细胞会被自身的免疫细胞破坏，引起Ⅰ型糖尿病，这是因为胰岛B细胞含有与该病毒相似的抗原（填物质）．从免疫学角度分析，I型糖尿病是一种自身免疫病，据此推断，该病可通过注射胰岛素治疗．
    （2）胰岛素可通过作用于下丘脑神经元抑制胰高血糖素的分泌，验证此现象的实验思路为：
    将大小、体重等相同的大鼠随机分成两组，一组在其下丘脑神经元周围施加适量的胰岛素溶液，另一组施加等体积生理盐水．该实验的观察指标是血液中胰高血糖素的浓度．为使实验结果更明显，实验前应使实验大鼠处于空腹（饥饿）状态．
    （3）日前，中科院陈雁研究组研究阐明了糖原代谢关键蛋白PPP1R3G在维持葡萄糖稳态中的作用，调节机理如图：

    小鼠试验发现：饥饿时肝细胞中PPP1R3G蛋白基因的表达水平提高，使糖原合成酶（GS）的活性提高，从而能够在进食后的短时间内，快速合成肝糖原，导致血糖水平快速降低；进食后该基因表达水平则降低．据此推测PPP1R3G基因的表达受进食和饥饿周期调控．该研究揭示了一个全新的餐后血糖调节机制．

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