Question

口蹄疫是由RNA病毒引起的一种偶蹄动物传染病．科学家尝试利用转基因番茄来生产口蹄疫疫苗（主要成分：该病毒的一种结构蛋白VP1），过程如图所示．请据图回答下列问题：

（1）在上述实验过程中所涉及的生物技术工程有

 

、

 

，如图所示②成功构建重组质粒的过程中，需要用到的工具有

 

．
（2）⑤过程形成的细胞具有

 

 特点，⑥过程中重要的两种植物激素是

 

 和

 

．
（3）⑥培养基中添加

 

可筛选能表达疫苗的细胞；检测转化成功的蕃茄植株，除检测标记基因产物外，还可采用

 

 技术检测目的基因在蕃茄体内是否转录．
（4）在该过程中，研究人员首先获取了目的基因，并采用

 

技术对目的基因进行扩增，该技术需要的条件是

 

、酶、ATP、模板；然后构建基因表达载体．

Answer 1

考点：基因工程的原理及技术,植物培养的条件及过程

专题：

分析：分析题图：图示是利用转基因番茄来生产口蹄疫疫苗的流程图，其中①为获取目的基因的过程；②为基因表达载体的构建过程；③④表示采用农杆菌转化法将目的基因导入受体细胞的过程；⑤表示脱分化过程；⑥为再分化过程；⑦为试管苗的生长发育过程．

解答： 解：（1）由以上分析可知，上述实验过程涉及的生物技术工程有基因工程、植物细胞工程；基因表达载体的构建过程中，需要限制酶切割含有目的基因的外源DNA分子和运载体，还需要用DNA连接酶连接目的基因和运载体形成重组质粒．
（2）⑤表示脱分化过程，该过程形成的产物是愈伤组织，具有分裂能力强，分化程度低的特点；⑥表示再分化过程，该过程中重要的两种植物激素是细胞分裂素和生长素．
（3）由图可知，运载体上的标记基因是卡那霉素抗性基因，因此在⑥培养基中添加卡那霉素可筛选能表达疫苗的细胞；检测目的基因是否转录形成mRNA可采用分子杂交技术，即用DNA分子探针和受体细胞中的mRNA分子进行杂交，观察是否形成杂交带．
（4）PCR技术可在体外快速扩增目的基因，PCR的条件：模板（目的基因）、原料（四种脱氧核苷酸）、引物、热稳定DNA聚合酶（Taq酶）．
故答案为：
（1）基因工程      植物细胞工程（或植物组织培养）      限制酶和DNA连接酶
（2）分裂能力强，分化程度低       细胞分裂素         生长素
（3）卡那霉素        分子杂交  
（4）PCR（聚合酶链式反应）      引物

点评：本题考查基因工程和植物组织培养等知识，要求考生识记基因工程的原理、操作步骤及应用，掌握各操作步骤中的方法及相关事项；识记植物组织培养技术的原理、条件及应用，能结合所学的知识答题，属于考纲识记层次的考查．