Question

18．红茶菌液是一种传统的活菌饮料，能帮助消化，治疗多种胃病．请根据制作流程并结合课本知识回答问题：

（1）红茶菌种是酵母菌、醋酸菌和乳酸菌的共生体，可以用稀释涂布平板（或平板划线）法分离纯化得到不同的菌种．在接种活菌之前要将红茶糖液先煮沸，目的是清除培养液中的杂菌，然后冷却，以防止高温杀死红茶菌；
（2）温度是酵母菌生长和发酵的重要条件18～25℃左右最适宜酵母菌繁殖．酵母菌是兼性微生物，若在培养液中加入酸性的重铬酸钾溶液后，呈现灰绿色，证明已经产生酒精；
（3）酵母细胞中蛋白质的提取和分离一般分为样品处理、粗分离、纯化和纯度鉴定四步．为了准确模拟生物体内的过程，保持细胞内外的pH一致，在样品处理的透析阶段，应将酵母蛋白溶液放人pH较低的缓冲液中．在装填凝胶柱时，不得有气泡存在，原因是气泡会搅乱洗脱液中蛋白质的洗脱次序，降低分离效果；
（4）当氧气、糖源都充足时，醋酸菌将培养液中的糖分解为醋酸；在利用乳酸菌制备泡菜时，需要测定亚硝酸盐的含量，在盐酸酸化条件下，亚硝酸盐与对氨基苯磺酸发生重氮化反应后，与N-I-萘基乙二胺盐酸盐结合形成玫瑰红色染料．

Answer 1

分析 1、分离菌种常用稀释涂布或平板划线法．
2、参与果酒制作的微生物是酵母菌，其新陈代谢类型为异养兼性厌氧型．果酒制作的原理：
（1）在有氧条件下，反应式如下：C₆H₁₂O₆+6H₂O+6O₂$\stackrel{酶}{→}$6CO₂+12H₂O+能量；             
（2）在无氧条件下，反应式如下：C₆H₁₂O₆$\stackrel{酶}{→}$2CO₂+2C₂H₅OH+能量．
3、参与果醋制作的微生物是醋酸菌，其新陈代谢类型是异养需氧型．果醋制作的原理：
当氧气、糖源都充足时，醋酸菌将葡萄汁中的果糖分解成醋酸．
当缺少糖源时，醋酸菌将乙醇变为乙醛，再将乙醛变为醋酸．
4、蛋白质的提取和分离一般分为四步：样品处理、粗分离、纯化和纯度鉴定．
5、测定亚硝酸盐含量的原理是在盐酸酸化条件下，亚硝酸盐与对氨基苯磺酸发生重氮反应后，然后与N-1-萘基乙二胺盐酸盐结合形成玫瑰红色染料．

解答 解：（1）分离菌种常用稀释涂布或平板划线法．在接种之前，红茶糖液要先煮沸后冷却，煮沸是清除培养液中杂菌．
（2）果酒发酵的适宜温度是18～25℃．酒精可与酸性重铬酸钾溶液发生化学反应，颜色由橙色变成灰绿色．
（3）蛋白质的提取和分离一般分为四步：样品处理、粗分离、纯化和纯度鉴定，纯度鉴定可用电泳法．为了准确模拟生物体内的过程，保持细胞内外的pH一致，在样品处理的透析阶段，应将酵母蛋白溶液放人pH较低的缓冲液中．气泡会搅乱洗脱液中蛋白质的洗脱次序，降低分离效果
（4）醋酸菌为好氧性细菌，故需在氧气充足的条件下将葡萄糖分解为醋酸．测定亚硝酸盐含量的原理是在盐酸酸化条件下，亚硝酸盐与对氨基苯磺酸发生重氮反应后，然后与N-1-萘基乙二胺盐酸盐结合形成玫瑰红色染料．
故答案为：
（1）稀释涂布平板（或平板划线）  清除培养液中的杂菌   
（2）18～25℃灰绿色
（3）纯度鉴定   缓冲液  蛋白质的洗脱次序
（4）氧气  对氨基苯磺酸

点评 本题考查微生物的分离和培养、果酒和果醋的制作、亚硝酸盐的测定等知识，对于此类试题，需要考生注意的细节较多，如实验的原理、实验采用的试剂及试剂的作用、实验现象等，需要考生在平时的学习过程中注意积累．