Question

【题目】基因工程的设计和操作中，启动子是运载体的重要组成部分．如图是一种克隆启动子的办法，请据图分析回答：
（1）启动子是识别和结合的部位．若要获得启动子的碱基序列不能依据基因表达产物推知，原因是 ．
（2）过程①、③分别使用的限制酶是 ．
（3）过程④的原理是 ， 需要用到的工具酶是 ．
（4）过程⑤中克隆的启动子与外源基因连接时，根据设计引物a．

Answer 1

【答案】
（1）RNA聚合酶；基因中启动子的碱基序列不能被转录
（2）BamHⅠHindⅢ
（3）DNA双链复制；Taq酶等热稳定聚合酶
（4）外源基因的核苷酸序列
【解析】解：（1）启动子是RNA聚合酶识别和结合的部位．基因中启动子的碱基序列不能被转录，因此要获得启动子的碱基序列不能依据基因表达产物推知．（2）根据过程①后的结果可知，该过程使用的限制酶是BamHⅠ；根据过程③的结果可知，该过程使用的限制酶是HindⅢ．（3）过程④采用PCR技术进行扩增，其原理是DNA双链复制；PCR操作是在较高温度下进行的，因此需要用到的工具酶是Taq酶等热稳定聚合酶．（4）PCR技术的前提条件是要有一段已知目的基因的核苷酸序以便合成一对引物．因此，过程⑤中克隆的启动子与外源基因连接时，根据外源基因的核苷酸序列设计引物a．

所以答案是：（1）RNA聚合酶 基因中启动子的碱基序列不能被转录 （2）BamHⅠHindⅢ（3）DNA双链复制 Taq酶等热稳定聚合酶（4）外源基因的核苷酸序列

【考点精析】本题主要考查了基因工程的原理及技术的相关知识点，需要掌握基因工程的原理是利用DNA重组技术才能正确解答此题．