Question

3．某同学用新鲜酸奶为实验材料初步分离纯化乳酸菌．分离纯化所用固体培养基中因含有15%的脱脂乳而不透明，乳酸菌能分解利用培养基中的蛋白质等物质．回答下列问题
（1）培养基的组成成分除乳酸菌生长繁殖所需的营养物质外，还必须添加琼脂．
（2）推测培养基中加入脱脂乳的作用是乳酸菌的（初步）鉴定，为乳酸菌提供N源等各种营养物质．
（3）分离纯化如果用稀释涂布平板法，梯度稀释时应该用无菌水对酸奶进行稀释．
（4）分离纯化如果用平板划线法，首次划线灼烧接种环的目的是防杂菌污染，为保证得到单个细菌繁殖而来的菌落，操作时必须做到
①每次划线前灼烧接种环；
③从第二次开始每次划线都从上次划线末端开始划线．

Answer 1

分析 1、培养基按物理性质分：

名称	特征	功能
固体培养基	外观显固体状态的培养基	主要用于微生物的分离、鉴定
液体培养基	呈液体状态的培养基	主要用于工业生产

2、划线分离操作中的有关问题：
（1）在操作的第一步以及每次划线之前都要灼烧接种环，在划线操作结束时，仍然需要灼烧接种环．

	第一次灼烧	每次划线之前灼烧	划线结束灼烧
目的	避免接种环上可能存在的微生物污染培养基	杀死上次划线结束后接种环上残留的菌种	杀死接种环上残留的菌种，避免细菌污染或感染操作者

②在灼烧接种环之后，要等其冷却后再进行划线，以免接种环温度太高，杀死菌种．
③在进行第二次以及其后的划线操作时'要从上一次划线的末端开始划线．每次划线后，线条末端细菌的数目比线条起始处要少，每次从上一次划线的末端开始，能使细菌的数目随着划线次数的增加而逐步减少，最终能得到由单个细菌繁殖而来的菌落．

解答 解：（1）选择培养基和部分鉴别培养基以及用于分离纯化的培养基是固体培养基，一般要加琼脂．
（2）脱脂乳被乳酸菌分解利用后形成透明圈，可以对乳酸菌进行初步鉴定，同时脱脂乳也给乳酸菌提供了N源等各种营养物质（包括维生素）．
（3）梯度稀释时要用无菌水，以防杂菌污染．
（4）首次接种灼烧是为了防杂菌污染．为保证得到单个细菌繁殖而来的菌落，操作时必须做到每次划线前灼烧接种环，从第二次开始，每次划线都从上次划线末端开始划线．
故答案为：
（1）琼脂
（2）乳酸菌的（初步）鉴定        为乳酸菌提供N源等各种营养物质
（3）无菌水
（4）防杂菌污染
①每次划线前灼烧接种环     ②每次划线都从上次划线末端开始划线

点评 本题考查微生物的分离和培养，要求考生识记培养基的成分、种类及功能；识记接种微生物常用的两种方法以及各种方法的操作中需要注意的细节，能结合所学的知识准确答题．