Question

【题目】乙型脑炎是由乙型脑炎病毒（JEV）引起的神经系统疾病。乙型脑炎病毒是一种RNA病毒，E蛋白参与病毒复制过程。市售灭活疫苗缺乏长效免疫，必须多次加强接种。研究人员利用基因重组的方法构建了三种新型JEV疫苗：E蛋白疫苗（A 疫苗）、重组病毒疫苗（B疫苗）和DNA疫苗（C疫苗），实验主要流程如下图所示。请回答下列问题：

（1）请填写图中①②的名称：①__________；②__________。

（2）利用小鼠模型评价以上三种疫苗的保护效果。将成年和幼年小鼠分组，每组10 只，分别注射不同的疫苗或试剂，检测小鼠体内效应T细胞的杀伤活性和对病毒攻击的免疫保护，结果如下表。

组别	1	2	3		4		5
注射物	A疫苗	B疫苗	C疫苗		载体		缓冲液
小鼠类别	成年	成年	成年	幼年	成年	幼年	成年	幼年
效应T细胞 杀伤活性	33%	39%	45%	37.5%	17%	18%	18%	8.5%
免疫保护	全部存活，无症状				4只死亡 6只有症状	全部死亡	4只死亡 6只有症状	全部死亡

三种疫苗注射到小鼠体内后，均能检测到乙型脑炎病毒的E蛋白，E蛋白作为________________激发小鼠的

__________免疫。为检验三种疫苗的免疫效果是否达标，还应给小鼠注射__________作为对照。

（3）进一步测量小鼠的血清抗体水平，部分结果如下图所示，第一次免疫后三种疫苗诱发的抗体水平无明显差异，但第2次免疫后，__________。研究者还发现，注射C疫苗后，幼年小鼠产生抗体明显高于成年小鼠，推测原因可能是由于DNA 疫苗注射到肌肉后，幼鼠肌细胞代谢旺盛，摄取__________的能力较强。

（4）综上所述，三种疫苗都能诱发小鼠产生__________，实现抗乙型脑炎病毒的保护作用。科研人员对DNA疫苗的使用持谨慎态度，请简要评述DNA疫苗的利弊：____________________。

Answer 1

【答案】 cDNA 限制酶和DNA连接酶 抗原 细胞 市售灭活疫苗 A疫苗产生抗体水平最高，且A、B疫苗产生的抗体水平都明显高于第一次免疫 C疫苗（重组质粒） 效应T细胞和抗体/细胞免疫和体液免疫 DNA疫苗能够激发较强的细胞免疫过程，但是机体细胞会摄取DNA疫苗，可能会引起安全性问题

【解析】试题分析：本题考查基因工程、免疫，考查对基因工程步骤、基因工程安全性、免疫过程的理解和识记。解答此题，可根据表格数据和柱形图判断三种疫苗效能的优劣。

（1）乙型脑炎病毒RNA经逆转录可得①cDNA；将E蛋白基因和P质粒连接需用②限制酶和DNA连接酶。

（2）效应T细胞是细胞免疫中发挥免疫作用的物质，乙型脑炎病毒的E蛋白作为抗原激发小鼠的细胞免疫。检验三种疫苗的免疫效果是否达标，还应给小鼠注射市售灭活疫苗作为对照。

（3）据图可知，第2次免疫后，A疫苗产生抗体水平最高，且A、B疫苗产生的抗体水平都明显高于第一次免疫。DNA 疫苗注射到肌肉后，幼鼠肌细胞代谢旺盛，摄取C疫苗（重组质粒）的能力较强，所以幼年小鼠产生抗体明显高于成年小鼠。

（4）根据题意，三种疫苗都能诱发小鼠产生效应T细胞和抗体（细胞免疫和体液免疫）。DNA疫苗的优点是能够激发较强的细胞免疫过程，但是机体细胞摄取DNA疫苗，可能会引起安全性问题。