Question

2．请回答与微生物分离和培养有关的问题：
（1）稀释涂布平板法分离纯化土壤中微生物的正确操作步骤是①②④③（填序号）．为减少误差，在设置平板是一般要3个或以上数目平板；若统计出在稀释倍数为10⁵的平板上的平均菌落数为30个，所用稀释液的体积为0.2ml，则每克样品中的菌落数为1.5×10⁷个．
①土壤取样
②称取10g土壤加入盛有90mL无菌水的锥形瓶中制备土壤提取液
③吸取0.1mL溶液进行涂布平板
④依次稀释至10¹、10²、10³、10⁴、10⁵、10⁶、10⁷稀释度
（2）无菌技术主要通过消毒和灭菌来避免杂菌的污染．其中对培养基进行灭菌的常用方法分别是高压蒸汽灭菌；要求实验操作应在酒精灯火焰旁进行，以避免周围环境中微生物的污染．
（3）如图是某同学对萃取的胡萝卜素样品所做的鉴定实验的结果．图中实验组是B、C，实验得出的结论是萃取样品中不含β-胡萝卜素．

Answer 1

分析 自然界中目的菌株的筛选的依据是根据它对生存环境的要求，到相应的环境中去寻找．实验室中目的菌株的筛选的原理是利用选择培养基人为提供有利于目的菌株生长的条件（包括营养、温度．pH等），同时抑制或阻止其他微生物生长．
从土壤中分离纤维素分解菌的一般步骤是：土壤取样、选择培养、梯度稀释、涂布培养和筛选菌株．
微生物的灭菌方法主要有高压蒸汽灭菌法、干热灭菌和灼烧灭菌．接种方法主要有稀释涂布平板法和平板划线法．

解答 解：（1）分离纯化土壤微生物的正确的操作步骤：①土壤取样，②制备土壤溶液，④制备土壤样品稀释液，③涂布平板分离．所以正确的操作顺序是①②④③．为减少偶然误差，在设置平板是一般要3个或以上数目平板；根据公式可知每克样品中的菌落数为：30÷0.2×10⁵=1.5×10⁷个．
（2）微生物培养中，培养基常用高压蒸汽灭菌法灭菌，培养皿等器具可以使用干热灭菌．为避免杂菌污染，接种时需要在酒精灯火焰旁进行．
（3）据图分析：A、D两点不是标准样品的点样位置，B、C两点不是实验样品的点样位置，图中实验组色素开始的终点与标准样品不一致，所以样品中不含β-胡萝卜素．
故答案为：
（1）①②④③3个   1.5×10⁷个
（2）高压蒸汽灭菌    酒精灯火焰旁
（3）B、C   萃取样品中不含β-胡萝卜素

点评 本题主要考查微生物的培养、筛选与分离，意在强化学生对相关知识的理解与运用，题目难度中等．