小鼠是实验室常用的实验动物,如:利用小鼠制备抗X病毒单克隆抗体、利用小鼠进行DNA重组研究中导致了“基因敲除”技术的出现.
Ⅰ用小鼠制备抗X病毒单克隆抗体.
(1)取一定数量的小鼠,定期间隔给它们注射适量的含X病毒的溶液,其目的是
.
(2)一段时间后,取小鼠脾脏中的相应细胞与小鼠骨髓瘤细胞融合,细胞能够融合的结构基础是
.融合时常用的化学试剂是
融合后形成的两两融合细胞有
种类型.我们需要的杂交瘤细胞的特点是
.
(3)为了保存有价值的杂交瘤细胞系,通常用超低温将其冻存,试分析其原因
.
Ⅱ、用小鼠进行DNA重组研究中形成的“基因敲除”技术,能“敲除”DNA分子上的特定基因.该技术的主要过程如下:
第一步:分离小鼠胚胎干细胞,这些细胞中含有需要改造的基因,称“靶基因”.
第二步:获取与“靶基因”同源的DNA片断,利用特定技术在该DNA片段上插入neo
R基因(新霉素抗性基因)成为突变DNA(如下图),使该片段上的靶基因失活.
第三步:将插入neo
R基因(新霉索抗性基因)的靶基因转移入胚胎干细胞,再通过同源互换,用失活靶基因取代两个正常靶基因中的一个,完成对胚胎干细胞的基因改造.
第四步:将第三步处理后的胚胎干细胞,转移到特定培养基中筛选培养.
其基本原理如图所示:
(4)该技术采用胚胎干细胞作为转入对象是因为胚胎干细胞具有
性.第二步中ne08基因插入靶基因使用的工具酶是
.neo
R基因不仅能使靶基因失活,还是
;“靶基因失活”的含义是
.第三步中,涉及的变异类型是
(5)从研究者成功获得如上图所示的“敲除”一个靶基因的胚胎干细胞,到将该细胞培育成“基因敲除”小鼠,运用到的生物技术有
、
等.
(6)科学家可以通过“基因敲除”来研究基因的功能,(5)小题中获得的基因敲除小鼠,
(能/不能)直接用来研究基因功能,原因是
.