Question

9．图一是培养小鼠胚胎成纤维细胞（MEF细胞）的示意图，图二是在用MEF细胞制成的饲养层上培养胚胎干细胞（ES细胞）的示意图．

（1）图一所示，制备细胞悬液时，常用胰蛋白酶来消化剪碎的组织块．配制培养液时，通常需要在合成培养基的基础上添加血清（或血浆）等一些天然成分．当MEF细胞分裂生长到细胞表面相互接触时就停止分裂，这种现象称为细胞的接触抑制．
（2）ES细胞是由早期胚胎（或原始性腺）中分离出来的一类细胞，ES细胞在功能上具有发育的全能性．
（3）MEF细胞能够分泌某些蛋白质，其合成到分泌至细胞外的过程是：核糖体→内质网→囊泡→高尔基体→囊泡，再通过胞吐方式分泌到细胞外．在培养液中单独培养ES细胞时，ES细胞容易发生分化，结合图二可推知MEF细胞的作用是抑制ES细胞分化．
（4）在治疗性克隆过程中，细胞核取自患者细胞，这是为了避免向患者移入组织细胞后体内发生免疫排斥反应．

Answer 1

分析 1、动物细胞培养过程：取动物组织块→剪碎组织→用胰蛋白酶处理分散成单个细胞→制成细胞悬液→转入培养液中（原代培养）→放入二氧化碳培养箱培养→贴满瓶壁的细胞用酶分散为单个细胞，制成细胞悬液→转入培养液（传代培养）→放入二氧化碳培养箱培养．
2、胚胎干细胞
（1）哺乳动物的胚胎干细胞简称ES或EK细胞，来源于早期胚胎或从原始性腺中分离出来．
（2）具有胚胎细胞的特性，在形态上表现为体积小，细胞核大，核仁明显；在功能上，具有发育的全能性，可分化为成年动物体内任何一种组织细胞．另外，在体外培养的条件下，可以增殖而不发生分化，可进行冷冻保存，也可进行遗传改造．
（3）胚胎干细胞的主要用途是：
①可用于研究哺乳动物个体发生和发育规律；
②是在体外条件下研究细胞分化的理想材料，在培养液中加入分化诱导因子，如牛黄酸等化学物质时，就可以诱导ES细胞向不同类型的组织细胞分化，这为揭示细胞分化和细胞凋亡的机理提供了有效的手段；
③可以用于治疗人类的某些顽疾，如帕金森综合症、少年糖尿病等；
④利用可以被诱导分化形成新的组织细胞的特性，移植ES细胞可使坏死或退化的部位得以修复并恢复正常功能；
⑤随着组织工程技术的发展，通过ES细胞体外诱导分化，定向培育出人造组织器官，用于器官移植，解决供体器官不足和器官移植后免疫排斥的问题．

解答 解：（1）图一所示，制备细胞悬液时，常用胰蛋白酶来消化剪碎的组织块，分散成单个细胞．配制培养液时，通常需要在合成培养基的基础上添加血清或血浆等一些天然成分．当MEF细胞分裂生长到细胞表面相互接触时就停止分裂，这种现象称为细胞的接触抑制．
（2）ES细胞是由早期胚胎（或原始性腺）中分离出来的一类细胞，ES细胞在功能上具有发育的全能性．
（3）分泌蛋白合成与分泌过程：核糖体合成蛋白质→内质网进行粗加工→高尔基体进行再加工→细胞膜，整个过程还需要线粒体提供能量．MEF细胞能够分泌某些蛋白质，其合成到分泌至细胞外的过程是：核糖体→内质网→囊泡→高尔基体→囊泡，再通过胞吐方式分泌到细胞外．在培养液中单独培养ES细胞时，ES细胞容易发生分化，结合图二可推知MEF细胞的作用是抑制ES细胞分化．
（4）在治疗性克隆过程中，细胞核取自患者细胞，这是为了避免向患者移入组织细胞后体内发生免疫排斥反应．
故答案为：
（1）胰蛋白      血清（或血浆）     接触抑制
（2）早期胚胎（或原始性腺）        全能性
（3）内质网    高尔基体      胞吐        抑制ES细胞分化
（4）免疫排斥

点评 本题结合图示，考查动物细胞培养的相关知识，要求考生识记动物细胞培养的过程、条件及相关应用，意在考查考生的识图能力和理解所学知识要点，把握知识间内在联系，形成知识网络结构的能力；能运用所学知识，准确判断问题的能力，属于考纲识记和理解层次的考查．