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    目的基因的分离是基因工程研究中的主要方面和操作关键。下面甲、乙图表示从真核生物细胞中获取目的基因的两种方法，请回答下列问题：

    （1）在甲图中，a过程是在________酶的作用下完成的。如果用该类酶中的一种，不一定能获取目的基因，其原因是：___________。

    （2）在乙图中，c过程在遗传学上称为________，d过程称为________，d过程需以________为模板，________为原料，还需要的条件是ATP、________、DNA聚合酶等。

    （3）除了上述两种方法可以获取目的基因外，请你再写出一种方法：________

    答案：
    解析：

    　　（9分，第（3）问2分，其余每空1分）

    　　（1）限制性内切　一种限制酶只能对特定的碱基序列进行识别与切割。

    　　（2）转录　逆转录　RNA　脱氧核苷酸　逆转录酶

    　　（3）根据蛋白质中氨基酸序列推测出基因的脱氧核苷酸序列，再进行人工合成。（2分）


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    科目：高中生物 来源：2011-2012学年江苏省扬州市邗江区高二下学期期中考试生物试卷（带解析） 题型：综合题

    基因克隆是对分离出来的目的基因进行大量扩增的过程。经过基因克隆，可以生产出大量的目的基因或在基因表达时获得大量的蛋白质。细菌质粒是基因克隆的合适载体，经研究发现，某些细菌质粒中含有两个抗生素抗性基因——氨苄青霉素抗性基因和四环素抗性基因，而且，在四环素抗性基因中存在限制酶的单一识别序列。
    下图表示利用质粒进行基因克隆的过程，其中A-D表示物质，I和II表示抗性基因，①—⑦表示过程，其它数字表示菌落，据图回答下列问题：

    （1）写出下列字母和编号的名称：A：        ； II：         。
    （2）将A和B形成D所需的酶是       。⑤过程中为提高成功率，常用       溶液处理大肠杆菌。
    （3）为筛选含有物质A的细菌，需进行细菌培养，先在培养基（一）中只加入氨苄青霉素，一段时间后，培养基上长出的细菌菌落具有       特性。然后，用灭菌绒布从培养基（一）中蘸取菌种，再按到只含四环素的培养基（二）中培养。根据培养基（一）和（二）上的细菌生长情况，可以判断图中菌落       （填数字）即为筛选出的含有物质A的细菌，原因是                                       。

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    科目：高中生物 来源：2012届江苏省南通市通州区高三重点热点专项检测生物试卷 题型：综合题

    基因克隆是对分离出来的目的基因进行大量扩增的过程。经过基因克隆，可以生产出大量的目的基因或在基因表达时获得大量的蛋白质。细菌质粒是基因克隆的合适载体，经研究发现，某些细菌质粒中含有两个抗生素抗性基因——氨苄青霉素抗性基因和四环素抗性基因，而且，在四环素抗性基因中存在限制酶的单一识别序列。
    下图表示利用质粒进行基因克隆的过程，其中A-D表示物质，I和II表示抗性基因，①—⑦表示过程，其它数字表示菌落，据图回答下列问题。

    （1）写出下列字母和编号的名称：A：   ▲    ； II：   ▲    。
    （2）将A和B形成D所需的酶是   ▲    。⑤过程中为提高成功率，常用   ▲    溶液处理大肠杆菌。
    （3）为筛选含有物质A的细菌，需进行细菌培养，先在培养基（一）中只加入氨苄青霉素，一段时间后，培养基上长出的细菌菌落具有   ▲    特性。然后，用灭菌绒布从培养基（一）中蘸取菌种，再按到只含四环素的培养基（二）中培养。根据培养基（一）和（二）上的细菌生长情况，可以判断图中菌落   ▲    （填数字）即为筛选出的含有物质A的细菌，原因是   ▲    。 

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    科目：高中生物 来源：2013届江苏省扬州市邗江区高二下学期期中考试生物试卷（解析版） 题型：综合题

    基因克隆是对分离出来的目的基因进行大量扩增的过程。经过基因克隆，可以生产出大量的目的基因或在基因表达时获得大量的蛋白质。细菌质粒是基因克隆的合适载体，经研究发现，某些细菌质粒中含有两个抗生素抗性基因——氨苄青霉素抗性基因和四环素抗性基因，而且，在四环素抗性基因中存在限制酶的单一识别序列。

    下图表示利用质粒进行基因克隆的过程，其中A-D表示物质，I和II表示抗性基因，①—⑦表示过程，其它数字表示菌落，据图回答下列问题：

    （1）写出下列字母和编号的名称：A：         ； II：          。

    （2）将A和B形成D所需的酶是        。⑤过程中为提高成功率，常用        溶液处理大肠杆菌。

    （3）为筛选含有物质A的细菌，需进行细菌培养，先在培养基（一）中只加入氨苄青霉素，一段时间后，培养基上长出的细菌菌落具有        特性。然后，用灭菌绒布从培养基（一）中蘸取菌种，再按到只含四环素的培养基（二）中培养。根据培养基（一）和（二）上的细菌生长情况，可以判断图中菌落        （填数字）即为筛选出的含有物质A的细菌，原因是                                        。

     

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    科目：高中生物 来源： 题型：

    科学家发现家蝇体内存在一种抗肿瘤蛋白（且具有抗菌能力），受到研究者重视。临床使用发现此蛋白质对肿瘤确良好的疗效，可以通过基因工程技术导入大肠杆菌内进行大量生产。其过程大体如图所示：

    （1）在基因工程中，获取目的基因的方法有______________________（至少写出两种）。

    （2）图中a过程叫_______________________，它是基因操作的核心步骤。

    （3）将抗肿瘤基因导入大肠杆菌，并在大肠杆菌细胞内成功表达产生了抗肿瘤蛋白，由于_______________________，因此在短时间内就能获得大量的抗肿瘤蛋白。

    （4）细胞工程可以作为辅助手段，通过获得特定的单克隆抗体并与抗肿瘤蛋白结合制成“生物导弹”，以实现“靶向杀癌”。下面是单克隆抗体制备过程示意图，请据图回答：

    ① 图中A过程从小鼠的脾脏中取得的“小鼠细胞”是_____________细胞，要获得能产生抗肿瘤蛋白抗体的杂交瘤细胞至少要经过_______________________次筛选。从小鼠体内提取分离该细胞之前，给小鼠注射的特定的物质是_______________________。

    ② 实验室无法单独培养能获得单克隆抗体的细胞。通过细胞工程获得的杂交瘤细胞由于具备_______________________的优点，使单抗技术获得成功。

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