Question

【题目】某生物兴趣小组成员用如图所示方法分离纯化分解尿素的微生物。请回答下列问题：

（1）图示接种方法是_____，图中接种工具的名称是_____。制备培养微生物的培养基时，调pH应在灭菌之_____（填“前”或“后”）。

（2）②中接种工具的冷却需在酒精灯火焰旁的原因是_____。

（3）纯化培养时，培养基中的唯一氮源是尿素，此外还应加入的营养物质有_____，在该培养基中加入_____指示剂，可对微生物进行初步鉴定。

（4）该实验还可以将菌液进行一系列的_____，再分别涂布到固体培养基表面进行培养。统计时，培养基表面生长的一个菌落来源于_____个活菌。

Answer 1

【答案】平板划线法 接种环 前 酒精灯火焰附近是无菌环境 碳源、水、无机盐 酚红 梯度稀释 一个或多

【解析】

培养基的成分：水、碳源、氮源、无机盐、生长因子。

常用的接种方法：平板划线法、稀释涂布平板法。

（1）根据③中接种后的结果可知，图示接种方法是平板划线法，该方法所用的接种工具是接种环。制备培养微生物的培养基时，应该先调pH后灭菌。

（2）②中接种工具的冷却需在酒精灯火焰旁的原因是酒精灯火焰附近是无菌环境。

（3）各种培养基一般都含有水、碳源、氮源、无机盐。因此纯化培养时，培养基中的唯一氮源是尿素，此外还应加入的营养物质有碳源、水、无机盐；分解尿素的微生物能合成脲酶，脲酶能将尿素分解成氨，会使培养基碱性增强，PH升高，所以可以用检测pH的变化的方法来判断尿素是否被分解，可在培养基中加入酚红指示剂，尿素被分解后产生氨，PH升高，指示剂变红。

（4）该实验还可以将菌液进行一系列的梯度稀释，再分别涂布到固体培养基表面进行培养。统计时，培养基表面生长的一个菌落来源于一个或多个活菌