Question

【题目】某小组同学为了调查湖水中细菌的污染情况而开展了一个探究实验，实验过程包括制备培养基、灭菌、接种及培养、菌落观察与计数等。请回答下列问题：

（1）制备培养基时，配方一般都含有水、碳源、氮源和________________________。

（2）接种环在接种前必须__________________________灭菌，然后待其冷却后再进行接种，冷却的目的是_____________。

（3）用稀释涂布平板法计数细菌个数时，为使估计值更接近实际值，应保证待测样品稀释度足够高，原因是__________________________。

（4）将1mL水样稀释100倍后在3个平板上用涂布法分别接入0.lmL稀释液；经适当培养后，3个平板上的菌落数分别为46、40、37。据此可得出每升水样中的活菌数为__________________________。统计的菌落数往往比活菌的实际数目__________________________。

（5）可通过观察平板上菌落的特征，如_____________（写两个），来判断湖水样品中细菌的种类。

（6）为了使实验结果可靠，应同时在另一灭菌的空白平板上接种_____________作为对照组。

Answer 1

【答案】 无机盐 灼烧 避免接种环境温度太高，杀死菌种 稀释度高的菌液中，微生物被分散成单个细胞，从而能在培养基表明形成的单个菌落 4.1×107 低 形状、大小、隆起程度、颜色 无菌水

【解析】本题考查微生物的培养，识记微生物培养中的相关知识点是解题关键

（1）培养基的营养组成一般都含有水、碳源、氮源和无机盐

（2）对接种环等接种工具用灼烧灭菌法，接种环在接种前必须灼烧灭菌，然后待其冷却后再进行接种，避免接种环境温度太高，杀死菌种。

（3）稀释涂布法是将菌液进行一系列的梯度稀释，再将不同稀释度的菌液分别涂布在固体培养基上进行培养，在稀释度足够高的菌液里，聚集在一起的微生物将被分散成单个细胞，从而能在培养基表面形成单个的菌落，所以用稀释涂布平板法计数细菌个数时，为使估计值更接近实际值，应保证待测样品稀释度足够高。

（4）因为不同平板之间的数据有差异，故用其平均值作为估算的最终结果，故每升水样中的活菌数为4.1×107; 有些活菌在培养过程中死亡,另外有些菌落是由多个活菌共同形成的,所以按形成的菌落数目来计算活菌数目,结果往往会低于活菌实际数目

（5）菌落特征包括菌落的大小、形状、边缘、光泽、质地、隆起程度、颜色和透明程度等

(6) 为了使实验结果可靠，应同时在另一灭菌的空白平板上接种无菌水作为对照组。

[点睛]： 微生物培养的易考点①培养基：包括组成成分、种类、②常用接种方法:平板划线法一般多用于菌种的纯化,可以观察菌落特征，对混合菌进行分离; 稀释涂布平板法一般多用于筛选菌株,可以计数，可以观察菌落特征.③无菌技术：注意灭菌与消毒的区别；④计数：显微镜直接计数和间接计数法；⑤操作过程的注意事项等。