Question

【题目】接种疫苗是对乙肝最有效的治疗方法。目前治疗性乙肝疫苗主要为基因工程疫苗。为了有效治疗慢性肝炎病毒，采用“双质粒”基因疫苗,其构建、生产过程如图：

（1）可通过________技术增加目的基因、联合基因的数量。

（2）图中的目的基因是指乙肝病毒结构中的_________________基因，其作用是____________________________________________________________。

（3）据图推知，利用IL-2、IFN-γ联合基因构建重组质粒-2的目的是 __________________________________。

（4）若要构成能有效表达的重组质粒1，并提高重组效率，选择的限制酶是______________；限制酶作用后，含目的基因1的乙肝病毒DNA区段将分解成_________个大小不一的片段。

（5）若用限制酶SnaBⅠ、AvrⅡ、BglⅡ联合酶切pCDNA质粒，获得的DNA片段的长度分别是6、4、48KB；用限制酶SnaBⅠ、BaMI、BglⅡ联合酶切pCDNA质粒，得到的DNA片段的长度分别是7.5、2.5、24、24KB；用箭头与数字在pCDNA质粒图中表示限制酶BaMI的位点。_______

（6）最近不乏有关转基因乙肝疫苗番茄、玉米等报道，认为吃番茄的同时就可以轻松获得疫苗接种，请从人体相关生理指出这种接种方式效果很不理想的依据：_____________ 。

乙肝病毒的遗传信息传递与表达过程如图 ：

（7）关于图的解释，正确的有_______。

A.需要DNA解旋酶的过程有①② B.逆转录过程是②③④

C.过程③发生在肝细胞的细胞质中 D.能发生A、U配对的过程有④⑥

Answer 1

【答案】PCR（体外扩增） 蛋白质或包膜或衣壳或酶 作为抗原，刺激机体发生免疫反应，产生记忆B、T淋巴细胞 表达IL-2、IFN-γ等免疫分子，注射给慢性乙肝患者，弥补患者体内IL-2、IFN-γ分子不足,促进T细胞分裂分化，形成更多致敏T细胞，提高细胞免疫功能 SnaBⅠ和BglⅡ 4 作用位点2个，分别作用于距SnaBⅠ酶切位点右侧1.5或2.5KB处，以及左侧24KB处

抗原主要有效成分是蛋白质，若口服，蛋白质易被消化道蛋白酶水解成不具抗原功能的氨基酸，不能起到抗原的作用 AD

【解析】

（1）PCR技术可在体外大量扩增目的基因。
（2）图2中的目的基因是指乙肝病毒结构中的蛋白质或包膜或衣壳或酶基因，其作用是作为抗原，刺激机体发生免疫反应，产生记忆B、T淋巴细胞。
（3）根据图1可知IL-2、IFN-γ是免疫分子，因此利用IL-2、IFN-γ联合基因构建重组质粒-2的目的是表达IL-2、IFN-γ等免疫分子，注射给慢性乙肝患者，弥补患者体内IL-2、IFN-γ分子不足，促进T细胞分裂分化，形成更多致敏T细胞，提高细胞免疫功能。
（4）由图可知，含有目的基因的外源DNA分子上含有限制酶SnaBⅠ、AvrⅡ、BglⅡ、AluⅠ的切割位点，若用AvrⅡ切割会破坏目的基因，若用AluⅠ切割会破坏质粒上的启动子，因此要构成能有效表达的重组质粒1，并提高重组效率，选择的限制酶是SnaBⅠ和BglⅡ；含有目的基因的外源DNA分子上含有2个BglⅡ切割位点，含有1个SnaBⅠ切割位点，因此用这两种限制酶作用后，含目的基因1的乙肝病毒DNA区段将分解成4个大小不一的片段。
（5）若用限制酶SnaBⅠ、AvrⅡ、BglⅡ联合酶切pCDNA质粒，获得的DNA片段的长度分别是6、4、48KB；用限制酶SnaBⅠ、BaMⅠ、BglⅡ联合酶切pCDNA质粒，得到的DNA片段的长度分别是7.5、2.5、24、24KB．因此，在pCDNA质粒中有2个限制酶BaMI的位点，分别作用于距SnaBⅠ酶切位点右侧1.5或2.5KB处，以及左侧24KB处，如图
或．
（6）抗原主要有效成分是蛋白质，若口服，蛋白质易被消化道蛋白酶水解成不具抗原功能的氨基酸，不能起到抗原的作用，因此通过吃番茄的方式接种疫苗的效果很不理想。
（7）A、图中①是DNA的复制过程，需要解旋酶；②是DNA双链解旋的过程，也需要DNA解旋酶，A正确；
B、图中②是解旋过程，③是转录过程，④是逆转录过程，B错误；
C．过程③是转录，发生在肝细胞的细胞核中，C错误；
D．能发生A、U配对的过程有④逆转录过程和⑥翻译过程，D正确。
故选：AD。