Question

17．人们使用含三丁基锡、三苯基锡等有机锡化合物的油漆涂于船只、海洋建筑物等的表面，有效防止了海洋生物附着生长，但近年来的研究发现油漆中的有机锡可释放入海，对多种生物造成毒害．现欲从海洋底泥中分离分解三丁基锡的微生物．回答下列问题：
（1）为了获得能降解三丁基锡的微生物菌种，可在被三丁基锡污染的海洋底泥中取样，并应选用以三丁基锡为碳源的培养基进行选择培养．除含有碳源外，培养基还应含有氮源、琼脂、无机盐和蒸馏水等．
（2）实验过程中，玻璃器皿和金属用具可以采用干热灭菌法来灭菌，原因是玻璃器皿和金属用具能耐高温，且要保持干燥．
（3）常用的微生物接种方法有两种，但只有稀释涂布平板法可用于微生物的计数，运用该方法计数的结果往往比实际数目低（填“高”或“低”）．在平板划线操作中，接种环在使用前要先灼烧，其目的是杀灭接种环上的微生物，第二次及其后的划线都要从上一次划线的末端开始，其目的是使微生物数目能够随着划线次数的增加而逐步减少，以达到分离的效果．
（4）将获得3种待选微生物甲、乙、丙分别接种在含少量三丁基锡的相同培养液中培养（培养液中其他营养物质充裕、条件适宜），观测从实验开始到微生物停止生长所用的时间，甲、乙、丙分别为33小时、15小时、46小时，则应选择微生物乙作为菌种进行后续培养．

Answer 1

分析 1、培养基为微生物提供生长、繁殖和积累代谢产物的营养物质．营养物质归纳为碳源、氮源、生长因子、无机盐和水．根据化学成分分为合成培养基、天然培养基等根据用途分选择培养基、鉴别培养基．根据性质分为液体、半固体和固体培养基．
2、筛选目的微生物需要使用选择培养基．
3、微生物的接种方法主要有平板划线法和稀释涂布平板法，其中稀释涂布平板法可以用来进行微生物的计数．
①平板划线法：将已经熔化的培养基倒入培养皿制成平板，接种，划线，在恒温箱里培养．在线的开始部分，微生物往往连在一起生长，随着线的延伸，菌数逐渐减少，最后可能形成单个菌落．
②稀释涂布平板法：将待分离的菌液经过大量稀释后，均匀涂布在培养皿表面，经培养后可形成单个菌落．

解答 解：（1）为了获得能降解三丁基锡的微生物菌种，可在被三丁基锡污染的海洋底泥中取样，并应选用以三丁基锡为碳源的培养基进行选择培养．培养基的成分主要包括碳源、氮源、水、无机盐等，因此除含有碳源外，培养基还应含有氮源、无机盐和蒸馏水等．选择培养基一般为固体培养基，因此培养基中应加入琼脂作为凝固剂．
（2）实验过程中，玻璃器皿和金属用具能耐高温，且要保持干燥，因此这些器具可以采用干热灭菌法来灭菌．
（3）常用的微生物接种方法有平板划线法和稀释涂布平板法两种，但只有稀释涂布平板法可用于微生物的计数，由于一个菌落可能是由两个或多个细菌长成，因此运用该方法计数的结果往往比实际数目低．在平板划线操作中，接种环在使用前要先灼烧，其目的是杀灭接种环上的微生物，第二次及其后的划线都要从上一次划线的末端开始，其目的是使微生物数目能够随着划线次数的增加而逐步减少，以达到分离的效果．
（4）在三组使用中，乙组所用时间最短，说明降解三丁基锡的能力最强，所以应选择乙组中的微生物作为菌种进行后续培养．
故答案为：
（1）三丁基锡     氮源        琼脂
（2）玻璃器皿和金属用具能耐高温，且要保持干燥
（3）稀释涂布平板法    低     杀灭接种环上的微生物      使微生物数目能够随着划线次数的增加而逐步减少，以达到分离的效果
（4）乙

点评 本题主要考查微生物的筛选、培养、培养基的制作等内容，意在强化学生对相关知识点的识记与理解．