Question

7．运用所学知识回答下列问题：
将苏云金杆菌Bt蛋白的基因导入棉花细胞中，可获得抗棉铃虫的转基因棉，其过程如如图所示（注：农杆菌中Ti质粒上只有T-DNA片段能转移到植物细胞中）．

（1）过程①需用同种限制性核酸内切酶对含Bt基因的DNA和Ti质粒进行酶切．为将过程②获得的含重组质粒的农杆菌筛选出来，应使用选择培养基．
（2）过程③中将棉花细胞与农杆菌混合后共同培养，旨在让T-DNA进入棉花细胞；除尽农杆菌后，还须转接到含卡那霉素的培养基上继续培养，目的是筛选获得T-DNA片段的植物细胞．
（3）检验转基因棉的抗虫性状，常用方法是投放棉铃虫．种植转基因抗虫棉能减
少农药的使用，以减轻环境污染．
（4）已知IgG抗体能消除狂犬病病毒．特异性IgG抗体获取也可用单克隆抗体制备法，下面是单克隆抗体的制备过程示意图，请回答下列问题．

①从小鼠的脾脏中取得B淋巴细胞之前，给小鼠注射的物质A是狂犬病病毒（抗原）．
②动物细胞融合除了采用植物原生质体融合常用的诱导方法外，还可以采用灭活的病毒．
③B过程的目的是筛选出能够产生特异性抗体的杂交瘤细胞．
④单克隆抗体与常规的血清抗体相比，最大的优越性是特异性强，灵敏度高，可大量制备．

Answer 1

分析 分析题图：图示为转基因抗虫棉的培育过程图，主要包括：①基因表达载体的构建；②将目的基因导入农杆菌中（采用农杆菌转化法）；③表示通过农杆菌转化法将目的基因导入受体细胞，并诱导受体细胞脱分化形成愈伤组织；④⑤再分化，将离体棉花植株培育成抗虫棉还需采用植物组织培养技术．

解答 解：（1）过程①表示基因表达载体的构建，为了获得相同的黏性末端，需用同种限制性核酸内切酶对含Bt基因的DNA和Ti质粒进行酶切．为将过程②获得的含重组质粒的农杆菌筛选出来，应使用选择培养基．
（2）过程③中将棉花细胞与农杆菌混合后共同培养，旨在让T-DNA进入棉花细胞；除尽农杆菌后，还须转接到含卡那霉素的培养基上继续培养，筛选获得T-DNA片段的植物细胞．
（3）检验转基因棉的抗虫性状，常用个体水平进行鉴定，即投放棉铃虫．种植转基因抗虫棉能减
少农药的使用，以减轻环境污染．
（4）①制备单克隆抗体需要获得已免疫的B淋巴细胞，因此需要给小鼠注射狂犬病病毒（抗原）．
②植物原生质体融合的方法包括物理法和化学法，动物细胞融合除了这两种诱导方法外，还可以采用灭活的病毒．
③B过程的目的是筛选出能够产生特异性抗体的杂交瘤细胞．
④单克隆抗体与常规的血清抗体相比，最大的优越性是特异性强，灵敏度高，可大量制备．
故答案为：
（1）限制性核酸内切酶   选择      
（2）T-DNA       筛选获得T-DNA片段的植物细胞
（3）投放棉铃虫    农药
（4）①狂犬病病毒（抗原）   ②灭活的病毒   ③筛选出能够产生特异性抗体的杂交瘤细胞
④特异性强，灵敏度高，可大量制备

点评 本题考查基因工程、单克隆抗体制备的相关知识，要求考生识记基因工程的概念、原理、操作步骤，掌握各操作步骤中需要注意的细节，识记单克隆抗体制备的过程和优点等，能结合所学的知识准确答题．