[题目]下表为某培养基的配方:成分牛肉膏葡萄糖K2HPO4伊红美蓝琼脂蒸馏水含量10g10g2g0.4g0.065g适量1000mL(1)以上培养基配方可以用于鉴别自来水中的 .菌落呈色.(2)若此培养基含有青霉素.可用于筛选含的转基因大肠杆菌.(3)根据培养皿上菌落的平均数可以计算自来水中大肠杆菌的密度.原因是 .(4)在5个培养基平板上.均接� 题目和参考答案——青夏教育精英家教网—

【题目】下表为某培养基的配方：

成分	牛肉膏	葡萄糖	K2HPO4	伊红	美蓝	琼脂	蒸馏水
含量	10g	10g	2g	0.4g	0.065g	适量	1000mL

（1）以上培养基配方可以用于鉴别自来水中的______，菌落呈_____色。

（2）若此培养基含有青霉素，可用于筛选含_________的转基因大肠杆菌。

（3）根据培养皿上菌落的平均数可以计算自来水中大肠杆菌的密度，原因是___________________________________________________。

（4）在5个培养基平板上，均接种稀释倍数为105的自来水样品溶液0．1mL，培养一段时间后，平板上长出的细菌菌落数分别为18、153、462、164和184。该过程采取的接种方法是过滤自来水后的滤膜放在此培养基上，此方法叫做_______，每升自来水中大肠杆菌的数量为________个；与血细胞计数板计数法相比，此计数方法测得的细菌数较小，原因是___________________________________。

（5）统计菌落数目时，一定要选取菌落数目稳定时的记录数据作为结果，可以防止__________________________________________________。

【答案】大肠杆菌黑青霉素抗性基因（或抗青霉素基因）当样品的稀释度足够高时，培养基表面生长的一个菌落，来源于样品稀释液中的一个活菌滤膜法 1．67×1011 血细胞计数法统计的是总菌数，而滤膜法统计时，当两个或多个细胞连在一起，平板上观察到的只是一个菌落，故用滤膜法测得的菌落数偏低培养时间不足而导致计数时遗漏部分菌落

【解析】

根据表格分析，该培养基的成分中牛肉膏可以提供碳源和氮源，葡萄糖可以提供碳源，磷酸氢二钾为无机盐；该培养基含有凝固剂琼脂，说明为固体培养基；该培养基含有伊红、美蓝，可以用于鉴别大肠杆菌。

（1）伊红-美蓝培养基可用于鉴别自来水中的大肠杆菌，菌落呈黑色。

（2）若此培养基含有青霉素，则其可用于筛选含青霉素抗性基因的大肠杆菌。

（3）由于当样品的稀释度足够高时，培养基表面生长的一个菌落，来源于样品稀释液中的一个活菌，所以根据培养皿上菌落的平均数可以计算自来水中大肠杆菌的密度。

（4）根据题意分析，该过程采取的接种方法是过滤自来水后的滤膜放在此培养基上，为滤膜法。统计的菌落数应介于30～300之间，故选择细菌菌落数为 153、164 和184的平板计数，每克该土壤样品中的菌落数对应的应该是每毫升菌液中的细菌数目，所以每升该土壤样品中的菌落数为(153+164+184)÷3÷0.1×105×103=1.67×1011。使用滤膜法计数时，当两个或多个细胞连在一起时，平板上观察到的只是一个菌落，而血细胞计数法计数统计的总菌数，包括活菌和死菌，所以用滤膜法计数测得的细菌数较少。

（5）统计菌落数目时，一定要选取菌落数目稳定时的记录数据作为结果，可以防止因培养时间不足而导致计数时遗漏部分菌落。

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