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    Rag2基因缺失小鼠因不能产生Rag2蛋白，导致其不能产生成熟的淋巴细胞．科研人员利用胚胎干细胞（ES细胞）对Rag2基因缺失小鼠进行基因治疗．其技术流程如图：

    （1）步骤①中，在核移植前应去除卵母细胞的
     
    （结构）．
    （2）培养细胞过程中，要置于CO2培养箱中，中CO2的主要作用是
     
    ，与培养植物细胞相比，培养基中特有的成分是
     
    ．
    （3）步骤③中，需要构建含有Rag2基因的表达载体．可以根据Rag2基因的
     
    设计引物，利用PCR技术扩增Rag2基因片段．用HindⅢ和PstⅠ限制酶分别在片段两侧进行酶切获得Rag2基因片段．为将该片段直接连接到表达载体，所选择的表达载体上应具有
     
    酶的酶切位点．将构建好的基因表达载体导入ES细胞的方法是
     

    （4）为检测Rag2基因的表达情况，可提取治疗后小鼠骨髓细胞的蛋白质，用抗
     
    的抗体进行杂交实验．
    考点：胚胎干细胞的来源及分化,动物细胞与组织培养过程
    专题：
    分析：
    分析图1：①表示核移植过程；②表示早期胚胎培养过程；③表示将目的基因导入ES细胞．
    分析图2：该DNA片段含有四种限制酶识别序列和切割位点，其中SamⅠ酶的识别序列和切割位点位于目的基因上．
    分析图3：图3为质粒结构示意图，该质粒含有2个标记基因（红色荧光标记基因和绿色荧光标记基因）．
    解答： 解：（1）核移植是将体细胞核移植到去核的卵母细胞中，所以实验前要去除卵母细胞的细胞核．
    （2）培养细胞过程中，要置于CO2培养箱中，CO2的主要作用是调节培养液PH，与培养植物细胞相比，培养基中特有的成分是动物血清．
    （3）步骤③是将目的基因导入ES细胞，该过程之前需要构建基因表达载体；DNA复制只能从5’到3’，因此构建前利用PCR技术扩增干扰素基因时，可以从图2中A、B、C、D四种单链DNA片段中选取B和C作为引物．由图可知，SamⅠ酶的识别序列和切割位点位于目的基因上，用该酶切割会破坏目的基因，因此对干扰素基因片段和质粒进行酶切时，可选用限制酶HindⅢ和PstⅠ或EcoRⅠ和PstⅠ．将构建好的基因表达载体导入ES细胞的方法是显微注射法．
    （4）为检测Rag2基因是否表达，可以采用抗原-抗体（Rag2蛋白）杂交法．
    故答案为：
    （1）细胞核  
    （2）调节培养液PH  动物血清  
    （3）核苷酸序列   HindⅢ和PstⅠ限制酶    
    （4）Rag2蛋白
    点评：本题以基因治疗的流程图为载体，考查了基因工程、细胞工程以及胚胎工程等方面的知识，难度适中．考生要能够识记细胞核移植的过程；识记囊胚包括内细胞团和滋养层两部分；明确基因工程中质粒和目的基因需要利用同种限制酶进行切割；掌握目的基因检测和鉴定的一般方法等．
    练习册系列答案
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    科目：高中生物 来源： 题型：

    小鼠睾丸中存在间质细胞和实质细胞，实质细胞就是精原细胞，间质细胞是为实质细胞提供营养物质和相关激素的细胞．科学家用显微镜观察从睾丸中所取的部分组织．下列有关说法正确的是（　　）
    A、实质细胞和间质细胞因遗传信息不同而功能不同
    B、间质细胞产生的激素不需要通过体液运输到靶细胞
    C、观察到染色体条数最多的细胞不含姐妹染色单体
    D、显微镜下能看到染色体的细胞最多含两条性染色体

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    科目：高中生物 来源： 题型：

    胰岛B细胞移植是一种有效治疗糖尿病的方法．利用小鼠再生胰腺提取物（RPE） 可定向诱导人羊膜间充质千细胞（hAMSCs） 分化成胰岛 B 细胞．请回答下列问题：
    （1）取人羊膜组织刮除血块、上皮细胞，冲洗后剪碎，然后用
     
    酶处理，最终制成hAMSCs 悬液．将细胞悬液放人培养瓶中进行原代培养，当细胞贴壁生长到一定阶段时，出现
     
    现象，此时细胞停止分裂增殖，这时需要将细胞进行相关处理，然后进行传代培养．
    （2）取传至第 3 代的hAMSCs放入细胞培养板，同时加入RPE 进行诱导分化培养．该代hAMSCs 能保持细正常的
     
    ．诱导分化培养15天后，提取细胞的
     
    ，用胰岛素基因探针进行分子杂交，可初步检测 hAMSCs 是否分化成胰岛 B 细胞．
    （3）用人的杂交瘤细胞来生产人源单克隆抗体难以成功，因此单克隆抗体大都来自鼠源．但鼠源单抗在人体内使用时，会产生较强的免疫原性，为解决这一问题，发明了嵌合抗体．大致过程如图所示：

    嵌合抗体能降低鼠源抗体的免疫原性，从图中可以推测，免疫原性的生主要与抗体的
     
    （选填“v 区“、“c 区“）有关．嵌合抗体的生产属于
     
    工程范畴．
    （4）科学家们用细胞融合实验证明，分化的细胞中存在“闲置不用“的结构基因．他们把大鼠肝肿瘤细胞和小鼠成纤维细胞融合成杂交瘤细胞，筛选出含有两套肝细胞染色体和一套成纤维细胞染色体的细胞．这些细胞既保持了合成大鼠肝细胞 3种特异蛋白的能力，也合成了小鼠肝细胞这 3 种蛋白，但是在正常的小鼠成纤中从不合成这些．由此可见，融合实验证明了小鼠成纤维细胞
     
    ．

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    科目：高中生物 来源： 题型：

    为研究光反应中ATP产生的原理，有科学家进行如下实验：将叶绿体类囊体置于pH为4的琥珀酸溶液后，琥珀酸进人类囊体腔，腔内的pH下降为4；然后把悬浮液的pH迅速上升为8，此时类囊体内pH为4，类囊体外pH为8，在有ADP和P1存在时类囊体生成ATP，对实验条件和结论分析正确的是（　　）
    A、黑暗中进行，结果表明：H+能通过自由扩散进出类囊体膜
    B、光照下进行，结果支持：合成ATP的能量直接来自色素吸收的光能
    C、黑暗中进行，结果支持：光反应使类囊体内外产生H+浓度差，推动ATP合成
    D、光照下进行，结果表明：光反应产生的[H]参与暗反应中三碳化合物的还原

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    科目：高中生物 来源： 题型：

    森林中，阳光可能会穿过森林中的空隙，在地上投下“光斑”，他们随着太阳的运动和枝叶的摆动而移动．如图显示了“光斑”照耀前后一株生长旺盛的植物光合作用过程中吸收CO2和释放O2的情况，请据图分析回答：

    （1）“光斑”照耀开始时，限制光合作用产物（糖类）合成的主要因素是
     
    速率；
    （2）题中A点时，光反应速率
     
    暗反应速率（填“大于”、“小于”或“等于”）；
    （3）当“光斑”移开是，CO2吸收速率发生如图所示变化的原因是“光斑”照耀期间积累的
     
    ，还可以使暗反应持续一段时间．
    （4）若对该植物如下处理：（甲）持续光照10分钟．（乙）光照5秒后再黑暗处理5秒，连续交替进行20分钟．若其它条件不变，则在甲、乙两种情况下植物所制造的有机物总量是：甲
     
    乙（填“多于”、“少于”、“等于”或“无法确定”），请以题中坐标图的信息从光反应产物进行分析，做出解释：
     
    ．

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    科目：高中生物 来源： 题型：

    假设在某一个群体中，AA、Aa、aa三种基因型的个体数量相等，A和a的基因频率均为50%．下图表示当环境发生改变时，自然选择对A或a基因有利时其基因频率的变化曲线．叙述正确的是（　　）
    A、曲线甲所示，该种群将进化成新物种
    B、随着代数的增加，Aa的基因型频率逐渐下降
    C、曲线甲表示当自然选择对隐性基因不利时显性基因频率的变化
    D、种群基因型频率的改变一定引起基因频率的改变

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    科目：高中生物 来源： 题型：

    某神经纤维静息电位的测量装置及结果如图l所示，图2是将同一测量装置的微电极均置于膜外．下列相关叙述正确的是（　　）
    A、图l中膜内的钾离子浓度甲处比膜外乙处低
    B、图2测量装置所测电压为0mV
    C、图2中若在①处给予适宜刺激（②处未处理），电流计的指针会发生两次偏转
    D、图2中若在③处给予适宜刺激，②处用药物阻断电流通过，则测不到电位变化

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    科目：高中生物 来源： 题型：

    图1表示人体内某些淋巴细胞的分化和特异性免疫的过程，图2表示免疫过程，X表示抗原，数字表示过程，m、n代表场所，其余字母表示细胞或物质，分析回答下列问题．

    （1）图1表示抵御病原体攻击的第
     
    道防线．
    （2）艾滋病病毒攻击图1中的细胞
     
    （填字母）．此细胞在体液免疫中除把抗原呈递给c细胞外，还产生
     
    （填专用名词），这种物质作用于
     
    细胞（填名称），促使其增殖分化成浆细胞和
     
    细胞（填字母），因此艾滋病患者的体液免疫的能力基本丧失．
    （3）图2中的
     
    细胞能使靶细胞裂解死亡．
    （4）为检测某疫苗是否有效，研究人员设计了如下实验方案：
    第一步：将
     
    健康动物分成对照组和实验组，每组均分为若干只．
    第二步：对照组接种不含疫苗的接种物，一段时间后再接种病毒；实验组接种疫苗，
     
    ．
    第三步：统计实验组和对照组动物的发病率、存活率．若与对照组相比，实验组动物发病率低、存活率高，则可以判断该疫苗有效．产生这一结果的原因是
     
    （填图1中数字）过程是实验组动物所特有的．

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    科目：高中生物 来源： 题型：

    南瓜的扁盘形、圆形、长形三种瓜形由两对等位基因控制（A、a和B、b），这两对基因独立遗传．现将2株圆形南瓜植株进行杂交，F1收获的全是扁盘形南瓜；F1自交，F2获得139株扁盘形、93株圆形、16株长形南瓜．据此推断，亲代圆形南瓜植株的基因型分别是（　　）
    A、aaBB和Aabb
    B、AAbb和aaBB
    C、aaBb和Aabb
    D、AABB和aabb

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