Question

7．回答下列有关生物工程的问题．
基因工程在农业生产上得到广泛运用，其生产过程如图1所示．

（1）构建重组Ti质粒时，需要PstI和EcoRI限制酶和DNA连接酶参与．
（2）下列关于质粒运载体的说法，正确的是AD．（多选）
A．使用质粒运载体是为了避免目的基因被分解
B．质粒运载体只能在与目的基因重组后进入细胞
C．质粒运载体可能是从细菌或者病毒的DNA改造的
D．没有限制酶就无法使用质粒运载体
（3）培养基中的卡那霉素会抑制香蕉愈伤组织细胞的生长．现若利用该培养基筛选已导入抗病基因的香蕉细胞，应使重组Ti质粒中含有抗卡那霉素基因，作为标记基因．
（4）由导入目的基因的细胞培养成转基因抗病香蕉，采用的是植物组织培养技术．诱导愈伤组织形成根时，则细胞分裂素与生长素的浓度比值为A．
A．0.5  B．1.0 C．1.5 D．2.0
（5）将此植物试管苗培养在含不同浓度蔗糖的培养基上一段时间后，单株鲜重和光合作用强度的变化如图2．据图分析，随着培养基中蔗糖浓度的增加，光合作用强度的变化趋势是逐渐减小，单株鲜重的变化趋势是先增加后下降．据图推测，若要在诱导试管苗生根的过程中提高其光合作用能力，应降低 （降低/增加）培养基中蔗糖浓度，以便提高试管苗的自养能力．

Answer 1

分析 根据题意和图示分析可知：含抗病基因的DNA含有限制酶PstⅠ、SmaⅠ、EcoRⅠ的切割位点，其中SmaⅠ酶的切割位点位于抗病基因（目的基因）上；质粒含有限制酶PstⅠ、SmaⅠ、EcoRⅠ、ApaⅠ的切割位点．所以要构建重组质粒，可以用限制酶PstⅠ、EcoRⅠ进行切割．
图中①表示脱分化过程、②表示再分化过程．

解答 解：（1）含抗病基因的DNA含有限制酶PstⅠ、SmaⅠ、EcoRⅠ的切割位点，其中SmaⅠ酶的切割位点位于抗病基因（目的基因）上；质粒含有限制酶PstⅠ、SmaⅠ、EcoRⅠ、ApaⅠ的切割位，所以要构建重组质粒，可以用限制酶PstⅠ、EcoRⅠ进行切割，然后再用DNA连接酶连接．
（2）A．使用质粒运载体是为了避免目的基因被分解，A正确；
B．无论与目的基因重组与否，质粒运载体都能进入宿主细胞，B错误；
C．质粒通常是来自细菌，病毒没有质粒，因此质粒运载体可能是从细菌的DNA改造形成的，C错误；
D．质粒作为运载体，必须有限制酶的切割位点，才能与目的基因整合重组，D正确．
（3）卡那霉素能抑制香蕉愈伤组织细胞的生长，欲利用该培养基筛选已导入抗病基因的香蕉细胞，应使基因表达载体A中含有抗卡那霉素基因，以此作为标记基因．
（4）由导入目的基因的细胞培养成转基因抗病香蕉，采用的是植物组织培养技术．在植物激素的使用过程中，细胞分裂素与生长素的比值低，有利于根的分化．
（5）据图分析，随着培养基中蔗糖浓度的增加，光合作用强度的变化趋势是逐渐减小，单株鲜重的变化趋势是先增加后下降．据图推测，若要在诱导试管苗生根的过程中提高其光合作用能力，应降低 培养基中蔗糖浓度，以便提高试管苗的自养能力．
故答案为：
（1）PstI和EcoRI   DNA连接
（2）AD
（3）抗卡那霉素基因
（4）植物组织培养   A
（5）逐渐减小   先增加后下降   降低

点评 本题结合转基因抗病香蕉的培育过程图，着重考查了基因工程和植物细胞工程的相关知识，要求考生识记基因表达载体的构成部分，标记基因及目的基因表达产物的鉴定方式，重点考查学生对于课本内容的记忆．