Question

18．人的血清白蛋白（HSA）在临床上需求量很大，通常从人血中提取．但由于艾滋病病毒（HIV）等人类感染性病原体造成的威胁与日俱增，使人们对血液制品顾虑重重．如果应用基因工程和克隆技术，将人的血清白蛋白基因转入奶牛细胞中，那么利用牛的乳汁生产血清白蛋白就成为可能．其大致过程如下：
Ⅰ．采集良种供体奶牛的卵母细胞和精液，通过体外受精，形成奶牛受精卵；
Ⅱ．将人血清白蛋白基因导入奶牛受精卵，形成重组细胞；
Ⅲ．电脉冲刺激重组细胞促使其形成早期胚胎；
Ⅳ．将胚胎移植到受体母牛的子宫中，最终发育成转基因小牛．
请回答下列问题：
（1）步骤Ⅰ中，在体外受精前，需要对奶牛的精子进行获能处理．受精时，往往一个卵母细胞只能和一个精子结合，受精过程中防止多精入卵的生理反应包括透明带反应和卵细胞膜反应
（2）实验步骤Ⅲ中，进行动物早期胚胎的体外培养时，培养液中除了含有各种无机盐和有机盐类、维生素、氨基酸、核苷酸等营养成分外，还要添加激素和动物血清．
（3）实验步骤Ⅳ中，在胚胎移植前可以取囊胚的滋养层细胞 做DNA分析鉴定性别，应选择性别为雌性的奶牛胚胎进行移植．
（4）若需迅速得到大量转基因奶牛，现有两种处理方法：
方法A：在步骤Ⅳ中将早期胚胎分离成若干个胚胎细胞，让其分别发育成一头小牛．进行上述操作时，应选择发育良好形态正常的桑椹胚或囊胚进行操作．
方法B：在步骤Ⅳ中将早期胚胎细胞的细胞核移植到普通黄牛的去核卵细胞细胞中，使其重组并发育成新胚胎．为获得大量可供移植的胚胎细胞核，可将早期胚胎细胞分离出来，在添加了的抑制因子培养液中，将其培养成能够增殖而不发生分化的胚胎干细胞，再从该细胞中提取所需的细胞核．上述两种方法中，最能保持步骤Ⅳ中早期胚胎细胞遗传特征的是方法A．

Answer 1

分析 1、体外受精过程包括卵母细胞的采集和培养、精子的采集和获能、体外受精，其中卵母细胞的采集和培养的方法：（1）主要方法是：用促性腺激素处理，使其超数排卵，然后，从输卵管中冲取卵子，直接与获能的精子体外受精．（2）第二种方法：从已屠宰母畜的卵巢中采集卵母细胞；
（3）第三种方法：是直接从活体动物的卵巢中吸取卵母细胞，叫活体采卵．
2、受精过程为：顶体反应→穿越放射冠→穿越透明带（透明带反应）→卵细胞膜反应（卵黄膜封闭作用）→卵子完成减数第二次分裂并释放第二极体→雌雄原核的形成、核膜消失，雌、雄原核融合形成合子→第一次卵裂开始．

解答 解：（1）在体外受精前，需要对奶牛的精子进行获能处理；受精过程中防止多精入卵的生理反应包括透明带反应和卵细胞膜反应
（2）动物细胞培养时，培养基中还需要加入激素和动物血清．
（3）实验步骤Ⅳ中，在胚胎移植前可以取囊胚的滋养层细胞做DNA分析鉴定性别；血清白蛋白要从乳汁中提取，只有雌性奶牛才能产生乳汁，因此胚胎移植时，必须选取雌性奶牛的胚胎进行移植．
（4）胚胎分割时应选择发育良好形态正常的桑椹胚或囊胚进行操作，由于来自同一个胚胎的后代具有相同的遗传物质，因此该方法能保持步骤Ⅳ中早期胚胎细胞遗传特征．在步骤Ⅳ中将早期胚胎细胞的细胞核移植到普通黄牛的去核卵细胞细胞中，使其重组并发育成新胚胎．为获得大量可供移植的胚胎细胞核，可将早期胚胎细胞分离出来，在添加了的抑制因子培养液中，将其培养成能够增殖而不发生分化的胚胎干细胞，再从该细胞中提取所需的细胞核．
故答案为：
（1）获能   透明带反应和卵细胞膜反应
（2）激素
（3）滋养层细胞   雌性
（4）桑椹胚或囊胚   去核卵细胞    抑制因子     A

点评 本题考查胚胎工程的相关知识，要求考生识记胚胎工程的技术及相关的细节，能结合材料中信息准确答题，属于考纲识记和理解层次的考查．