Question

13．美国威斯康星州的一个奶牛场有一头奶牛，年产奶量达30.8t，我国奶牛产奶量年平均水平仅为3～4t．某人用该高产奶牛的耳朵细胞，采用核移植技术获得高产奶牛（如下图）．

（1）动物细胞培养的原理是细胞增殖，在此过程中为了防止培养液被污染，还需在培养液中添加一定量的抗生素，此外还应定期更换培养液，防止细胞代谢产物积累对细胞自身造成危害．
（2）用于核移植的供体细胞，一般都选用10代以内的细胞，采集的卵母细胞也需在体外培养至MⅡ期后，再去核．
（3）核移植中选择去核卵母细胞作为受体细胞的原因是卵母细胞体积大，易操作，营养物质丰富，且细胞质中含有激发细胞核全能性表达的物质．
（4）将重组胚胎移入代孕母牛子宫内的最佳时期是桑椹胚或囊胚．胚胎移植实质上是早期胚胎在相同的生理环境下空间位置的转移．

Answer 1

分析 1、动物细胞培养的条件：（1）无菌、无毒的环境：①消毒、灭菌；②添加一定量的抗生素；③定期更换培养液，以清除代谢废物．
（2）营养物质：糖、氨基酸、促生长因子、无机盐、微量元素等，还需加入血清、血浆等天然物质．
（3）温度和PH：36.5℃±0.5℃；适宜的pH：7.2～7.4．
（4）气体环境：95%空气（细胞代谢必需的）和5%的CO₂（维持培养液的PH）．
2、胚胎移植的基本程序主要包括：①对供、受体的选择和处理（选择遗传特性和生产性能优秀的供体，有健康的体质和正常繁殖能力的受体．用激素进行同期发情处理，用促性腺激素对供体母牛做超数排卵处理）；②配种或人工授精；③对胚胎的收集、检查、培养或保存（对胚胎进行质量检查，此时的胚胎应发育到桑椹或胚囊胚阶段）；④对胚胎进行移植；⑤移植后的检查．

解答 解：（1）动物细胞培养的原理是细胞增殖；动物细胞培养要保持无菌、无毒的环境，为了防止培养液被污染，还需在培养液中添加一定量的抗生素，此外还应定期更换培养液，防止细胞代谢产物积累对细胞自身造成危害．
（2）10代以内的细胞能保持正常的二倍体核型，因此用于核移植的供体细胞，一般都选用10代以内的细胞；采集的卵母细胞也需在体外培养至MⅡ期后，再去核．
（3）核移植中选择去核卵母细胞作为受体细胞的原因是卵母细胞体积大，易操作，营养物质丰富，且细胞质中含有激发细胞核全能性表达的物质．
（4）胚胎移植的最佳时期是桑椹胚或囊胚．胚胎移植实质上是早期胚胎在相同的生理环境下空间位置的转移．
故答案为：
（1）细胞增殖    抗生素    更换培养液
（2）10    MⅡ
（3）卵母细胞体积大，易操作，营养物质丰富，且细胞质中含有激发细胞核全能性表达的物质
（4）桑椹胚或囊胚     早期胚胎在相同的生理环境下空间位置的转移

点评 本题考查动物细胞培养、核移植、胚胎移植等知识，要求考生识记动物细胞培养的具体过程，掌握动物细胞培养的条件；识记胚胎移植的基本程序，掌握胚胎移植的生理学基础，能结合所学的知识准确答题．