Question

【题目】利用紫外线诱变选育高产β-胡萝卜素的三孢布拉霉负菌，未突变菌不能在含有一定浓度的β-紫罗酮的培养基上生长，菌体随β-胡萝卜素含量增加从黄色加深至橙红色．图甲为选育及提取获得β-胡萝卜素流程，请回答下列问题：

（1）用紫外线照射三孢布拉霉负菌的目的是______．为选出高产突变菌种，还应在培养基中添加______，在接入菌种前，应对培养基进行______，以避免杂菌污染．

（2）某同学进行正确的接种操作后，平板经培养后的菌落分布如图乙所示．该同学的接种方法是______；由于______，所以培养基上只有少数菌能生长形成菌落．

（3）进行③过程时，应选取______色的菌落接种至液体培养基．过程⑥是______，用纸层析法鉴定提取的胡萝卜素粗品．

（4）将萃取的胡萝卜素样品与β-胡萝卜素标样层析后进行比对，结果如图丙，从图中分析可知，色带______为β-胡萝卜素．

Answer 1

【答案】诱导其发生基因突变 一定浓度的β-紫罗酮 高压蒸汽灭菌 稀释涂布平板法 基因突变频率低，只有少数基因突变的菌才能生长、繁殖 橙红 浓缩 I

【解析】

胡萝卜素的提取：

（1）胡萝卜素的性质：胡萝卜素是橘黄色结晶，化学性质比较稳定，不溶于水，微溶于乙醇，易溶于石油醚等有机溶剂。

（2）胡萝卜素的提取来源

提取天然胡萝卜素的方法主要有：一是从植物中提取；二是从大面积养殖的岩藻中荻得；三是利用微生物的发酵生产。

（3）萃取剂：最适宜作胡萝卜素萃取剂的是石油醚。

（4）实验流程：胡萝卜→粉碎→干燥→萃取（石油醚）→过滤→浓缩→胡萝卜素→鉴定（纸层析法）。

（1）用紫外线照射三孢布拉霉负菌的目的是诱导其发生基因突变；由于未突变菌不能在含有一定浓度的β-紫罗酮的培养基上生长，因此在选出高产突变菌种时，还应在培养基中添加一定浓度的β-紫罗酮；在接入菌种前，应对培养基进行高压蒸汽灭菌，以避免杂菌污染。

（2）乙图固体平板培养基中菌落均匀分布，该同学的接种方法是稀释涂布平板法；由于基因突变频率低，且基因突变是不定向性，因此只有少数基因突变的菌才能生长、繁殖．

（3）菌体随β-胡萝卜素含量增加从黄色加深至橙红色，因此③过程选择β-胡萝卜素含量高的菌株时，应选取橙红色的菌落接种至液体培养基；过程⑥是浓缩。

（4）据图分析，将萃取的胡萝卜素样品与β-胡萝卜素标样层析后进行比对，色带Ⅰ为β-胡萝卜素，其余两色带的极性比β-胡萝卜素高，色素带显极性，而且具有亲水性，易于滤纸上吸附的水结合，且分子量大，分子间的相互作用力也大，这样在固定相中移动的速度就慢。