Question

【题目】I．胰岛素A、B链分别表达法是生产胰岛素的方法之一。如图是该方法所用的基因表达载体，请回答下列问题：

（1）图中基因表达载体中没有标注出来的基本结构是________。

（2）图中启动子是____________识别和结合的部位，有了它才能启动目的基因的表达；氨苄青霉素抗性基因的作用是________________________。

（3）构建基因表达载体时必需的工具酶有__________________________。

（4）β﹣半乳糖苷酶与胰岛素A链或B链融合表达，可将胰岛素肽链上蛋白酶的切割位点隐藏在内部，其意义在于___________________________。

（5）溴化氰能切断肽链中甲硫氨酸羧基端的肽键，用溴化氰处理相应的融合蛋白能获得完整的A链或B链，且β﹣半乳糖苷酶被切成多个肽段，其原因可能是________________。

II. 人工种子是人们模仿天然种子的结构制造出来的生命有机体，它能像天然种子一样萌发生长。人工种子的核心部分是胚状体。其培育过程如图所示。

（1）制作人工种子依据的原理是_______________。

（2）某二倍体植物基因型为DdTt，利用花药离体培养的方法，可培育成“花粉胚”，也可制成人工种子，这种种子萌发形成的个体称为_________，从生殖类型看属于_______生殖。

Answer 1

【答案】 终止子 RNA 聚合 作为标记基因，将含有重组质粒的大肠杆菌筛选出来 限制酶和DNA 连接酶 防止胰岛素的 A、B 链被（菌体内）蛋白酶降解 β﹣半乳糖苷酶中含多个甲硫氨酸，而胰岛素 A、B 链中不含甲硫氨酸 植物细胞全能性 单倍体 有性

【解析】试题分析：I．.本题结合图解，考查基因工程的相关知识，要求考生识记基因工程的操作工具及具体的操作步骤，掌握各步骤中的相关细节，能结合图中信息准确答题。II.植物组织培养过程是：离体的植物器官、组织或细胞脱分化形成愈伤组织，然后再分化生成根、芽，最终形成植物体。分析题图：图中①②为脱分化过程，③为再分化过程。

I．（1）根据题意和图示分析可知：图1基因表达载体中已有目的基因、启动子和标记基因，所以没有标注出来的基本结构是终止子。

（2）图1中启动子是RNA聚合酶酶识别和结合的部位，有了它才能启动目的基因的表达即转录过程。氨苄青霉素抗性基因的作用是作为标记基因，将含有重组质粒的大肠杆菌筛选出来。

（3）构建基因表达载体的过程中，必须用相同的限制酶切割（含目的基因的外源DNA分子）和运载体，以产生相同的黏性末端，再加入DNA连接酶将目的基因和运载体连接形成重组DNA分子。

（4）β-半乳糖苷酶与胰岛素A链或B链融合表达，可将胰岛素肽链上蛋白酶的切割位点隐藏在内部，这样可以防止胰岛素的A、B链被菌体内蛋白酶降解。

（5）溴化氰能切断肽链中甲硫氨酸羧基端的肽键，由于β-半乳糖苷酶中含有多个甲硫氨酸，而胰岛素的A、B链中不含甲硫氨酸，所以用溴化氰处理相应的融合蛋白能获得完整的A链或B链，且β-半乳糖苷酸被切成多个肽段。

II.（1）制作人工种子需要采用植物组织培养技术，其原理是植物细胞具有全能性。

（2）由花粉直接培养形成的植株为单倍体，花粉是减数分裂形成的，因此从生殖方式看属于有性生殖。