Question

18．将目的基因导入动物受精卵内可得到转基因动物．回答问题：
（1）将目的基因导入动物受精卵内需要构建基因表达载体，基因表达载体除了含有目的基因外，还必须有启动子、终止子和标记因子等．常用显微注射将目的基因与表达载体导入动物的受精卵中．为检测目的基因是否表达成功，可采用抗原一抗体杂交方法，若有杂交带出现，表明目的基因已表达成功．
（2）在体外培养受精卵时，为了维持无菌环境，影响培养液中添加抗生素．受精卵发育到囊胚时期开始分化，该时期的内细胞团属于胚胎干细胞．该细胞在形态上表现为体积小、细胞核大，核仁明显；在功能上具有发育的全能性．
（3）将早期胚胎移植到代孕雌性体内时，为使代孕个体与供体雌性生殖器官的生理变化相同，此前需要对代孕个体做同期发情处理．

Answer 1

分析 1、基因工程技术的基本步骤：
（1）目的基因的获取：方法有从基因文库中获取、利用PCR技术扩增和人工合成．
（2）基因表达载体的构建：是基因工程的核心步骤，基因表达载体包括目的基因、启动子、终止子和标记基因等．
（3）将目的基因导入受体细胞：根据受体细胞不同，导入的方法也不一样．将目的基因导入植物细胞的方法有农杆菌转化法、基因枪法和花粉管通道法；将目的基因导入动物细胞最有效的方法是显微注射法；将目的基因导入微生物细胞的方法是感受态细胞法．
（4）目的基因的检测与鉴定：分子水平上的检测：①检测转基因生物染色体的DNA是否插入目的基因--DNA分子杂交技术；②检测目的基因是否转录出了mRNA--分子杂交技术；③检测目的基因是否翻译成蛋白质--抗原-抗体杂交技术．个体水平上的鉴定：抗虫鉴定、抗病鉴定、活性鉴定等．
2、胚胎干细胞具有胚胎细胞的特性，体积较小，细胞核大，核仁明显；在功能上，具有发育的全能性，可分化为成年动物任何一种组织细胞．另一方面，在体外培养条件下，ES细胞可不断增殖而不发生分化，可进行冷冻保存，也可以进行某些遗传改造．

解答 解：（1）基因表达载体的组成包括：目的基因、启动子、终止子和标记因子等．将目的基因导入受体细胞常用显微注射法．为检测目的基因是否表达成功，可采用抗原一抗体杂交方法，若有杂交带出现，表明目的基因已表达成功．
（2）在体外培养受精卵时，为了维持无菌环境，影响培养液中添加抗生素．囊胚的内细胞团属于胚胎干细胞，在形态上表现为体积小、细胞核大，核仁明显，在功能上具有发育的全能性．
（3）将早期胚胎移植到代孕雌性体内时，为使代孕个体与供体雌性生殖器官的生理变化相同，此前需要对代孕个体做同期发情处理．
故答案为：
（1）启动子、终止子和标记因子      显微注射      抗原一抗体杂交
（2）无菌环境       内细胞团       体积小、细胞核大，核仁明显       发育的全能性
（3）同期发情

点评 本题考查基因工程、胚胎工程等知识，要求考生识记基因工程的原理及操作步骤，掌握各操作步骤中需要注意的细节；识记胚胎移植的基本程序，掌握胚胎移植的生理学基础，能结合所学的知识准确答题．