Question

15．植物叶肉细胞原生质体的分离和培养的主要过程如图所示：
（1）获得原生质体后，需对其进行活力检查，下列各实验中，最合适的检测实验是B．
A．观察原生质体的结构是否完整
B．观察细胞质的流动
C．观察细胞有丝分裂
D．观察叶绿体数目的多少
（2）从叶片的叶肉细胞到获得胚状体的过程中，需要经过D．
①无丝分裂   ②减数分裂  ③有丝分裂
④原代培养 ⑤传代培养  ⑥植物体细胞杂交
⑦脱分化     ⑧再分化    ⑨细胞融合
A．①④⑤⑧⑨B．②④⑤⑥⑧⑨C．②⑧⑨D．③⑦⑧
（3）c步骤的DPD培养基与d步骤所用培养基的主要区别是培养基中生长素和细胞分裂素的含量比例不同．
（4）若为了获得三七的细胞产物，则只需培养到愈伤组织．若为了获得三七的人工种子，则需要培养到胚状体．
（5）如果愈伤组织是转基因植物细胞培养产生的，在通过基因工程培育转基因植物的过程中，微生物能起到的重要作用有工具酶的主要来源提供目的基因提供运载体基因文库中的受体细胞（至少答两点）．
（6）目的基因进入受体细胞内，并且在受体细胞内维持稳定和表达的过程，称为转化．早期的基因工程操作都用原核生物作为受体细胞是由于原核生物繁殖快、多为单细胞、遗传物质相对较少．

Answer 1

分析 1、转化--目的基因进人受体细胞内，并在受体细胞内维持稳定和表达的过程．
2、原核生物特点：繁殖快、多为单细胞、遗传物质相对较少等．（也是常用原核生物作为受体的原因）
3、植物组织培养的过程：外植体$\stackrel{脱分化}{→}$愈伤组织$\stackrel{再分化}{→}$胚状体→新植体．

解答 解：（1）细胞质的流动是活细胞都具有的特征，因此获得原生质体后，需对其进行活力检查，最合适的检测实验是观察细胞质的流动．
（2）从叶片的叶肉细胞到获得胚状体的过程中，需要经过③有丝分裂、⑦脱分化和⑧再分化过程．
（3）决定植物脱分化和再分化的关键因素是：植物激素的种类和比例，特别是生长素和细胞分裂素的协同作用在组织培养过程中非常重要，被称为“激素杠杆”．因此，c脱分化的DPD培养基与d再分化所用培养基的主要区别是培养基中生长素和细胞分裂素的含量比例不同．
（4）若为了获得三七的细胞产物，则只需脱分化培养到愈伤组织．若为了获得三七的人工种子，则需要再分化培养到胚状体．
（5）如果愈伤组织是转基因植物细胞培养产生的，在通过基因工程培育转基因植物的过程中，微生物能起到的重要作用有工具酶的主要来源、提供目的基因、提供载体、基因文库中的受体细胞等．
（6）目的基因进入受体细胞内，并且在受体细胞内维持稳定和表达的过程，称为转化．早期的基因工程操作都用原核生物作为受体细胞是由于原核生物繁殖快、多为单细胞、遗传物质相对较少．
故答案为：
（1）B
（2）D
（3）培养基中生长素和细胞分裂素的含量比例不同
（4）愈伤组织        胚状体
（5）工具酶的主要来源   提供目的基因   提供运载体  基因文库中的受体细胞
（选填二项，其他合理答案也可）
（6）转化         繁殖快、多为单细胞、遗传物质相对较少

点评 本题结合图解，考查基因工程和细胞工程的相关知识，要求考生识记基因工程的原理及操作步骤，掌握各操作步骤中需要注意的细节问题；识记植物组织培养的过程、条件等基础知识，能结合所学的知识准确答题．