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8.如图是微生物平板划线示意图,划线的顺序为12345,下列说法中正确的是(  )
A.操作前要将接种环放在酒精灯旁灼烧灭菌
B.划线操作须在火焰上方进行
C.只有在5区才可以得到所需菌落
D.在12345区域中划线前后都要对接种环灭菌

分析 平板划线的操作的基本步骤是:
1、右手持接种环,经火焰灭菌,待凉后,在火焰旁打开盛有菌液的试管棉塞,并将试管口过火焰,将以冷却的接种环伸入菌液,沾取一环菌液,将试管口过火焰丙塞上棉塞.
2、左手斜持琼脂平板,皿盖打开一条缝,右手于火焰近处將接种环迅速伸入平板内,划三至五条平行线,盖上皿盖,接种环不应划破培养基表面.
3、烧灼接种环,杀灭环上残留菌液,待冷却(是否冷却,可先在培养基边缘处试触,若琼脂溶化,表示未凉,稍等再试),从第一区域划线的末端开始往第二区内划线,重复以上操作,在第三四五区内划线,注意不要将最后一区的划线与第一区相连.
4、将平板倒置,放入培养箱中培养.

解答 解:A、在每次划线前后都要对接种环进行灭菌,接种环的灭菌方法应是在火焰上灼烧,A错误;
B、接种时划线操作是在火焰周围进行,B错误;
C、在5个区域中,只要有单个活细菌,通过培养即可获得所需菌落,C错误;
D、在1、2、3、4区域中划线前都要对接种环进行灼烧灭菌,保证每次划线的菌种来自上一区域的末端,5区域划线前都要对接种环进行灼烧灭菌目的是防止杂菌污染,1区域划线后进行灼烧灭菌是防止污染环境及操作者,D正确.
故选:D.

点评 本题主要考查平板划线法的操作步骤及摘要事项,意在提高学生实验中无菌操作意识和相关实验技能.

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