Question

9．利用转基因技术培育抗病香蕉．培育过程如图所示．

（1）获得抗病基因后，常利用PCR技术进行扩增，该技术的前提是要有一段已知目的基因的核苷酸序列，以便根据这一序列合成引物．该技术需要的酶是Taq（热稳定的DNA聚合酶）酶．
（2）将目的基因导入植物细胞常用的方法有多种，图中所示方法为农杆菌转化法．欲检测转基因香蕉的DNA上是否插入了目的基因，可采用DNA分子杂交技术．
（3）植物组织培养技术包括脱分化和再分化两个阶段，培养基中的生长素和细胞分裂素的比例将影响细胞发育的方向．
（4）香蕉的抗病性状主要存在野生的二倍体香蕉品种中，还可以利用植物体细胞杂交技术将三倍体香蕉体细胞与二倍体香蕉体细胞进行融合培育抗病香蕉，该技术常用的化学诱导剂是聚乙二醇（PEG）．

Answer 1

分析 1、分析图解：根据图示，SmaⅠ限制酶的切割位点位于目的基因上，选用限制酶切割时不能破坏抗病基因，所以应选用PstⅠ和EcoRⅠ对含有抗病基因的DNA和质粒进行切割．
植物基因工程利用了植物组织培养技术，图中①表示脱分化，②表示再分化，并且该过程中只进行有丝分裂．
2、基因表达载体的组成：目的基因+启动子+终止子+标记基因．
启动子是RNA聚合酶特异性识别和结合的DNA序列，是基因的一个组成部分，控制基因表达（转录）的起始时间和表达的程度．
终止子是给予RNA聚合酶转录终止信号的DNA序列．
3、目的基因分子水平上的检测：①检测转基因生物染色体的DNA是否插入目的基因--DNA分子杂交技术
②检测目的基因是否转录出了mRNA--分子杂交技术
③检测目的基因是否翻译成蛋白质--抗原-抗体杂交技术．

解答 解：（1）利用PCR技术扩增目的基因的前提是要有一段已知目的基因的核苷酸序列，再依据这一序列合成引物，该过程需要的酶是热稳定DNA聚合酶．
（2）将目的基因导入植物细胞的方法有：农杆菌转化法、基因枪法和花粉管通道法，图中采用的是最常用的农杆菌转化法．可采用DNA分子杂交技术检测转基因香蕉的DNA上是否插入了目的基因．
（3）植物组织培养包括脱分化和再分化两个阶段，而决定植物脱分化和再分化的关键因素是：植物激素的种类（生长素和细胞分裂素）和比例．
（4）可以利用植物体细胞杂交技术将三倍体香蕉体细胞与二倍体香蕉体细胞进行融合培育抗病香蕉，该技术常用的化学诱导剂是聚乙二醇（PEG）．
故答案为：
（1）PCR    引物     Taq（热稳定的DNA聚合酶）
（2）农杆菌转化法      DNA分子杂交
（3）再分化     生长素      细胞分裂素
（4）植物体细胞杂交      聚乙二醇（PEG）

点评 本题考查了植物基因工程的相关知识，考生要能够分析图解判断使用的限制酶种类，原则是不能破坏目的基因；识记基因结构中启动子和终止子的生理作用；识记目的基因检测与鉴定的方法；识记植物组织培养的过程及细胞的分裂方式，属于考纲中识记、理解层次的要求．