Question

【题目】番茄病毒病可以造成植株长势衰退、产量降低。“卡特琳娜”是从荷兰引进的番茄新品种，而在我国推广种植过程中，该品种普遍表现为植株矮化、顶部叶片常出现稍褪绿发黄等病毒病症状，严重影响果实产量和品质。探明“卡特琳娜”番茄病毒病的主要致病病毒，对培育脱毒苗至关重要。请回答下列相关问题：

（1）对“卡特琳娜”番茄植株进行致病病毒检测可采用RT-PCR技术，该方法是从番茄植株的组织细胞中提取mRNA，以mRNA为模板在__________酶的作用下合成cDNA，再以其为模板进行PCR扩增，然后与现有病毒核酸进行杂交检测。若要构建“卡特琳娜”番茄的cDNA文库，具体操作是__________。

（2）利用PCR技术扩增目的基因所具备的前提是__________序列，以便根据这一序列合成所需的__________。

（3）“卡特琳娜”番茄病毒病无有效药剂可以防治，种植脱毒苗木是较有效的防控措施培育脱毒苗常选择__________作为外植体，原因是____________________。培养该脱毒苗所用的技术称为__________。

Answer 1

【答案】逆转录 取“卡特琳娜”番茄发育的某个时期的mRNA反转录产生的多种DA片段，与载体连接后储存在一个受体菌群中，即可得到“卡特琳娜”番茄的cDNA文库 要有一段已知目的基因的核苷酸 引物 茎尖（或根尖） 茎尖（或根尖）病毒极少，甚至无毒 植物组织培养

【解析】

RT-PCR即逆转录-聚合酶链反应。其主要原理是：提取细胞中的总RNA，在逆转录酶的作用下合成cDNA，再以cDNA为模板进行PCR扩增。PCR扩增过程需要添加引物、耐高温的DNA聚合酶（Taq酶）和四种脱氧核苷酸。

（1）对“卡特琳娜”番茄进行致病病毒检测可采用RT一PCR技术，该方法是从番茄植株的组织细胞中提取mRNA，以mRNA为模板在逆转录酶的作用下合成cDNA再以cDNA为模板进行PCR扩增，然后与现有病毒核酸进行杂交检测。若要构建“卡特琳娜”番茄的cDNA文库，具体操作是取“卡特琳娜”番茄发育的某个时期的mRNA反转录产生的多种cDNA片段，与载体连接后储存在一个受体菌群中，即可得到“卡特琳娜”番茄的cDNA文库。

（2）利用PCR技术扩增目的基因所具备的前提是要有一段已知目的基因的核苷酸序列，以便根据这一序列合成所需的引物。

（3）培育脱毒苗常选择茎尖（或根尖）作为外植体，原因是这些部位病毒极少甚至无毒。由离体的器官、组织或细胞培育成整个植物体用到的技术为植物组织培养。