Question

6．某研究者用抗原（A）分别免疫3只同种小鼠（X、Y和Z），每只小鼠免疫5次，每次免疫一周后测定各小鼠血清抗体的效价（能检测出抗原抗体反应的血清最大稀释倍数），结果如下图所示．

若要制备杂交瘤细胞，需取免疫后小鼠的B淋巴细胞（染色体数目40条），并将该细胞与体外培养的小鼠骨髓瘤细胞（染色体数目60条）按一定比例加入试管中，再加入聚乙二醇诱导细胞融合，经筛选培养及抗体检测，得到不断分泌抗A抗体的杂交瘤细胞．回答下列问题：
（1）制备融合所需的B淋巴细胞时，所用免疫小鼠的血清抗体效价需达到16000以上，则小鼠最少需要经过四次免疫后才能有符合要求的．达到要求后的X、Y、Z这3只免疫小鼠中，最适合用于制备B淋巴细胞的是Y小鼠，理由是Y小鼠的抗体效价最高．
（2）细胞融合实验完成后，融合体系中除含有未融合的细胞和杂交瘤细胞外，可能还有B淋巴细胞相互融合形成的细胞和骨髓瘤细胞相互融合形成的细胞，体系中出现多种类型细胞的原因是细胞融合是随机的，且融合率达不到100%．
（3）杂交瘤细胞中有1个细胞核，染色体数目为100条．
（4）未融合的B淋巴细胞经多次传代培养后都不能存活，原因是①B淋巴细胞高度分化，不能恶性增殖；②不可能渡过原代培养和传代培养过程中的两次危机．

Answer 1

分析 据图分析，在第四次没有过程中出现了Y血清抗体均达到16000以上；在第五次中，Y的效价最大，最适合用于制备B淋巴细胞；B细胞与骨髓瘤细胞形成的杂交细胞有三种：B淋巴细胞自身融合的细胞，骨髓瘤细胞自身融合的细胞和杂交瘤细胞．融合形成的杂交瘤细胞，具有2个亲本的染色体，故染色体为100条．

解答 解：（1）据图分析，第四次注射后X、Y、Z小鼠的血清抗体效价均达到16000以上，小鼠Y的B淋巴细胞产生抗体效价最高，最适用于制备单克隆抗体．
（2）融合体系中除了未融合的细胞和杂交瘤细胞之外，还有骨髓瘤细胞和B淋巴细胞的自身融合产物，由于细胞膜具有流动性，且诱导之后的细胞融合不具有特异性，故体系中会出现多种类型的细胞．
（3）杂交瘤细胞形成后，由于核膜具有流动性，故小鼠的免疫B淋巴细胞核与其骨骼瘤细胞核会融合形成一个杂交的细胞核．小鼠的B淋巴细胞（染色体数目40条）和骨髓瘤细胞（染色体数目60条）融合后，染色体可达100条，在有丝分裂后期染色体数目临时加倍为200条，但此时细胞中没有细胞核． 
（4）未融合的B淋巴细胞经经多次传代培养后，仍然不是能恶性增殖的细胞，同时B淋巴细胞不可能渡过原代培养和传代培养过程中的两次危机达到细胞系水平． 
故答案为：
（1）四    Y     Y小鼠的血清抗体效价最高；
（2）B淋巴细胞相互融合形成的细胞，骨髓瘤细胞相互融合形成的细胞     细胞融合是随机的，且融合率达不到100%
（3）1    100
（4）①B淋巴细胞高度分化，不能恶性增殖；②不可能渡过原代培养和传代培养过程中的两次危机

点评 本题考查单克隆抗体制备的相关知识，意在考查学生的识图和判断能力，属于中档题．