Question

（18分，每空2分）凝乳酶是奶酪生产中的关键性酶。直接利用动、植物生产凝乳酶受多种因素限制，培育高酶活力凝乳酶微生物菌种是目前最有前途的发展方向。用紫外线照射芽孢杆菌，分离、培养，并检测各菌株所产生的凝乳酶活力。操作过程如图1所示。请分析回答：

（1）图1所示的b过程的目的是为获得 ，接种用的平板培养基 （是/不是）选择培养基。

（2）在一定温度下（35℃），一定时间内（通常为40分钟），凝固1mL10%脱脂奶粉的酶量为一个酶活力单位（U）。凝乳酶活力检测结果如图2所示。

①据图2所示，酶催化能力最强的是 组。

②A2、A5组酶活力与A0组芽孢杆菌相同，两位同学对此做出了推测：

同学甲：A2、A5组芽孢杆菌未发生基因突变，而其他组发生的变化说明基因突变具有 的特点。

同学乙：A2、A5组芽孢杆菌发生基因突变，但凝乳酶蛋白未改变，其依据的理由是 。为了验证上述2位同学的假设，可采用 技术检测凝乳酶基因是否发生了突变。

（3）从牛胃液中分离到的凝乳酶以催化能力强而被广泛应用，研究人员运用基因工程技术，将编码该酶的基因转移到了微生物细胞中。

①从牛胃细胞中提取 ，再逆转录形成cDNA。以此cDNA为模板PCR扩增目的基因。

②构建重组DNA分子（如图3所示）最好选用 限制酶。

③研究发现，如果将该凝乳酶20位和24位氨基酸改变为半胱氨酸，其催化能力将提高2倍。通过蛋白质工程生产高效凝乳酶，所需步骤有 。

a. 蛋白质的结构设计 b. 蛋白质的结构和功能分析

c. 蛋白质结构的定向改造 d. 凝乳酶基因的定向改造

e. 将改造后的凝乳酶基因导入受体细胞 f. 将定向改造的凝乳酶导入受体细胞

Answer 1