分析 血红蛋白的提取和分离:
1、原理:凝胶色谱法是根据相对分子质量的大小来分离蛋白质的有效方法,相对分子质量小的蛋白质容易进入凝胶内部的通道,路程长,移动的速度慢,相对分子质量大的蛋白质不容易进入凝胶内部的通道,路程短,移动的速度快,因此相对分子质量不同的蛋白质得以分离.
2、用磷酸缓冲液处理的目的是让血红蛋白处在稳定的pH范围内,维持其结构和功能.
3、分离血红蛋白溶液时,将搅拌好的混合液转移到离心管中,经过中速长时离心后,可明显看到试管中溶液分为4层,从上往下数,第1层为甲苯层,第2层为脂溶性物质的沉淀层,第3层为血红蛋白水溶液,第4层为杂质沉淀层.
4、气泡会搅乱洗脱液中蛋白质的洗脱次序,降低分离效果.
5、血红蛋白的提取与分离的实验步骤主要有:(1)样品处理:①红细胞的洗涤,②血红蛋白的释放,③分离血红蛋白溶液.(2)粗分离:①分离血红蛋白溶液,②透析.(3)纯化:调节缓冲液面→加入蛋白质样品→调节缓冲液面→洗脱→收集分装蛋白质.(4)纯度鉴定--SDS聚丙烯酰胺凝胶电泳.6、电泳法是利用待测样品中各种分子带电性质的差异和分子本身的大小、形状不同,使带电分子产生不同的迁移速度,从而实现样品中各种分子的分离或鉴定.
解答 解:(1)样品处理中红细胞的洗涤要用生理盐水反复冲洗、离心.向红细胞悬液中加入一定量的低浓度pH=7.0的缓冲液并充分搅拌,可以破碎红细胞,破碎细胞的原理是渗透原理(当外界溶液浓度低于动物细胞内液浓度时,细胞吸水涨破).
(2)血红蛋白粗分离阶段,透析的目的是除去小分子杂质.
(3)电泳利用了待分离样品中各种分子的带电性质以及分子大小、形状等的差异,而产生不同的迁移速度,实现各种分子的分离.
(4)由如图2可知携带者有2种血红蛋白,因为携带者具有(控制血红蛋白的)一对等位基因,可以控制合成两种不同的蛋白质.
故答案为:
(1)生理盐水 渗透原理(当外界溶液浓度低于动物细胞内液浓度时,细胞吸水涨破)
(2)除去小分子杂质 增加缓冲液的量或及时更换缓冲液
(3)带电性质以及分子大小、形状
(4)2 携带者具有(控制血红蛋白的)一对等位基因,可以控制合成两种不同的蛋白质
点评 本题结合图解,考查蛋白质的提取和分离,对于此类试题,需要考生注意的细节较多,如实验的原理、实验过程、实验采用的试剂及试剂的作用等,需要考生在平时的学习过程中注意积累.
科目:高中生物 来源: 题型:解答题
表3 | |||||
第一个字母 | 第二个字母 | 第三个字母 | |||
U | C | A | G | ||
A | 异亮氨酸 | 苏氨酸 | 天冬胺酸 | 丝氨酸 | U |
异亮氨酸 | 苏氨酸 | 天冬胺酸 | 丝氨酸 | C | |
异亮氨酸 | 苏氨酸 | 赖氨酸 | 精氨酸 | A | |
甲硫氨酸 | 苏氨酸 | 赖氨酸 | 精氨酸 | G |
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科目:高中生物 来源: 题型:选择题
A. | O项 | B. | 1项 | C. | 2项 | D. | 3项 |
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科目:高中生物 来源: 题型:解答题
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科目:高中生物 来源: 题型:选择题
A. | 装置1中放入NaOH溶液的目的是吸收种子细胞呼吸释放的CO2 | |
B. | x代表消耗O2的体积,y代表释放CO2的体积 | |
C. | 为使测得的数值更精确,还应再设置一对照装置,内放无生命力的种子和蒸馏水 | |
D. | 如果要测定已经长出真叶的幼苗的呼吸熵,需要将装置放在黑暗处 |
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科目:高中生物 来源: 题型:选择题
A. | 目的基因 限制性核酸内切酶 运载体 体细胞 | |
B. | 重组DNA RNA聚合酶 限制性核酸内切酶 连接酶 | |
C. | 工具酶 目的基因 运载体 受体细胞 | |
D. | 模板DNA 信使RNA 质粒 受体细胞 |
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科目:高中生物 来源: 题型:选择题
A. | 细胞的癌变发生于原代培养向传代培养的过渡过程中 | |
B. | 动物细胞培养液中通常含有葡萄糖、氨基酸、无机盐、生长素和动物血清等 | |
C. | 动物细胞培养前和培养过程中都要用胰蛋白酶处理 | |
D. | 动物细胞培养的目的是获得大量的细胞分泌蛋白 |
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科目:高中生物 来源: 题型:解答题
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科目:高中生物 来源: 题型:选择题
A. | 4和32 | B. | 2和32 | C. | 4和64 | D. | 2和64 |
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