Question

18．家蚕细胞具有高效表达外源基因能力．将人干扰素基因导入家蚕细胞并大规模培养，可以提取干扰素用于制药．
（1）进行转基因操作前，需用胰蛋白酶（或胶原蛋白酶）酶短时处理幼蚕组织，以便获得单个细胞．
（2）为使干扰基因在家蚕细胞中高效表达，需要把来自cDNA文库的干扰素基因片段正确插入表达载体的启动子和终止子之间．
（3）采用PCR技术可验证干扰素基因是否已经导入家蚕细胞．PCR技术利用的原理是DNA分子的复制，该PCR反应体系的主要成分应该包含：扩增缓冲液（含Mg²⁺）、水，4种脱氧核苷酸、模板DNA、Taq酶（耐高温的DNA聚合酶）和（干扰素基因特异性的DNA）引物对（两种引物）．
（4）生物反应器培养家蚕细胞时会产生接触抑制，所以培养时通常将多孔的中空薄壁小玻璃珠放入反应器中，这样可以增大细胞贴壁生长的附着面积增加培养的细胞数量，也有利于空气交换．

Answer 1

分析 解答本题从动物细胞培养、基因表达载体的组成、PCR技术所需条件等知识点着手考虑．

解答 解：（1）为了使组织分散开为单个细胞通常用胰蛋白酶或胶原蛋白酶．
（2）基因表达载体包括启动子、终止子、目的基因和标记基因．启动子位于目的基因的首端，终止子位于目的基因的尾端．
（3）PCR反应体系的主要成分应该包含：扩增缓冲液（含Mg²⁺）、水、4种脱氧核糖苷酸、模板DNA、TaqDNA聚合酶和一对DNA引物；在PCR反应过程中，有一个环节是从较高的温度冷却到相对较低的55℃左右，其作用让引物结合到互补DNA链上，形成局部双链．
（4）利用生物反应器培养家蚕细胞时，贴壁生长的细胞会产生接触抑制．通常将多孔的中空薄壁小玻璃珠放入反应器中，这样可以增大细胞贴壁生长的附着面积增加培养的细胞数量，也有利于空气交换．
故答案为：
（1）胰蛋白酶（或胶原蛋白酶）
（2）启动子     终止子
（3）DNA分子的复制        Taq酶（耐高温的DNA聚合酶）      （干扰素基因特异性的DNA）引物对 （两种引物）
（4）增大细胞贴壁生长的附着面积

点评 本题考查基因工程、细胞工程等相关知识，着重识记动物细胞培养和PCR技术的有关内容，意在考查考生的识记能力和应用能力，属于容易题．