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11.犬细小病毒(Canine Parvovirus,CPV)主要感染幼犬,传染性极强,死亡率接高.犬细小病毒单克隆抗体(CPV McAb)可抑制病毒对宿主细胞的侵染及病毒的复制,进而消灭犬体内病毒.请回答:
(1)在单克隆抗体CPV McAb的制备过程中,所用到的细胞工程技术有动物细胞融合、动物细胞培养.
(2)给成年鼠注射CPV,一段时间后,若鼠血清中抗犬细小病毒(CPV)的抗体检测呈阳性,说明体内产生了体液免疫.(体液或细胞)
(3)将已免疫小鼠的B淋巴细胞与骨髓瘤细胞融合,获得能分泌CPV McAb的杂交瘤细胞的过程中至少要进行两次筛选,一次是通过选择培养基筛选出杂交细胞,另一次是通过抗原--抗体杂交筛选出能分泌CPV McAb的杂交瘤细胞.
(4)杂交瘤细胞进行细胞培养时,为防止污染,通常还要在培养液中需要加入抗生素;培养箱中的空气要混有5%的二氧化碳用以调节培养液的pH.最后大规模培养时,可以将杂交瘤细胞注入到小鼠内增殖,这样从小鼠腹水中就可以提取到大量的单克隆抗体.
(5)通过上述方法得到的单克隆抗体可快速准确地识别CPV,其原因是该抗体具有特异性强、灵敏度高的特点.

分析 在单克隆抗体的制备过程中使用的细胞工程技术有动物细胞融合和动物细胞培养;抗原侵入机体后,发生体液免疫,体内产生抗犬细小病毒的抗体;在单克隆抗体的制备过程中,在选择培养基中有两次筛选,第一次筛选的目的是选择出杂交瘤细胞,第二次筛选的目的是选择出能分泌犬细小病毒单克隆抗体的杂交瘤细胞,采用抗原--抗体杂交法;单克隆抗体的特点是特异性强、灵敏度高,并可大量制备.

解答 解:(1)在单克隆抗体的制备过程中使用的细胞工程技术有动物细胞融合和动物细胞培养.
(2)抗原侵入机体后,发生体液免疫,体内产生抗犬细小病毒的抗体.
(3)在单克隆抗体的制备过程中,在选择培养基中有两次筛选,第一次筛选的目的是选择出杂交瘤细胞,第二次筛选的目的是选择出能分泌犬细小病毒单克隆抗体的杂交瘤细胞,采用抗原--抗体杂交法.
(4)杂交瘤细胞进行细胞培养时,为防止污染,通常还要在培养液中需要加入抗生素;培养箱中的空气要混有5%的二氧化碳用以调节培养液的pH.最后大规模培养时,可以将杂交瘤细胞注入到小鼠腹腔内腹水内增殖,这样从中就可以提取到大量的单克隆抗体.
(5)单克隆抗体的特点是特异性强、灵敏度高,并可大量制备.
故答案为:
(1)动物细胞融合、动物细胞培养
(2)犬细小病毒(CPV)       体液
(3)选择     抗原--抗体杂交
(4)抗生素      小鼠腹水
(5)特异性强、灵敏度高

点评 本题主要考查单克隆抗体的制备过程,要求考生能够识记单克隆抗体制备的过程,识记单抗的优点,识记动物细胞培养的条件,识记诱导动物细胞融合的方法,属于考纲识记和理解层次的考查.

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实验步骤项       目试管1试管2试管3
1加入可溶性淀粉溶液2ml2ml2ml
2加入新鲜唾液淀粉酶溶液1ml1ml1ml
3加入1mol/L的HCl溶液1ml//
加入1mol/L的NaOH溶液/1ml/
加入pH为7.0的蒸馏水//1ml
4置于37℃水浴中5min5min5min
5滴入碘液2滴2滴2滴
A.加入的溶液、试剂的量一样,是为了排除无关变量的影响
B.操作步骤设计不合理
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           温度
酶的相对活性(%)
10℃20℃30℃40℃
a酶40659575
b酶15609725
c酶10255090
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B.c酶的最适温度大于40℃
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D.三种酶中较适宜温度环境的最可能是c酶

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