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    6．如图1为某种常用质粒的序列图，Lac Z基因编码的酶能使无色的X-gal变为蓝色，Amp为氨苄青霉素抗性基因．图2为目的基因的序列及其相关限制酶的识别序列．请回答下列问题：

    （1）若要筛选成功导入目的基因的重组质粒，培养基中应加入的物质有X-gal和氨苄青霉素，构建重组质粒时需要的工具酶有限制酶、DNA连接酶，对获取的目的基因可用PCR技术对其扩增．
    （2）实验小组用BamHⅠ和BlgⅡ两种限制酶切割目的基因和质粒，构建重组质粒后导入大肠杆菌中，在筛选重组质粒的培养基上，若大肠杆菌菌落显蓝色，说明导入了不含目的基因的空白质粒．若大肠杆菌菌落显白色，说明导入了重组质粒，没有导入任何外源DNA的大肠杆菌不能（填“能”或“不能”）在该培养基上生存．
    （3）将若干个质粒和目的基因用BamHⅠ和BlgⅡ两种限制酶切割后，用DNA连接酶相连，然后再用BamHⅠ和EcoRⅠ切割成功连接后的产物，获得了长度为0.7kb、2.8kb、1kb和2.5kb四种长度的DNA片段，则目的基因的长度为1.8kb（已知目的基因的长度大于1kb，1kb=1000个碱基对）．

    分析 根据题意和图示分析可知：质粒中，抗氨苄青霉素抗性基因（Amp'）和LacZ基因都属于标记基因，目的基因上存在BamHⅠ和BlgⅡ两种酶的酶切位点，质粒上存在BamHⅠ和EcoRⅠ两种酶的酶切位点．一般为了防止目的基因和质粒反向连接，用两种限制酶切割目的基因和质粒．

    解答 解：（1）由于Lac Z基因编码的酶能使无色的X-gal变为蓝色，Amp为氨苄青霉素抗性基因，所以若要筛选成功导入目的基因的重组质粒，培养基中应加入的物质有X-gal和氨苄青霉素．构建重组质粒时需要的工具酶有限制酶和DNA连接酶，对获取的目的基因可用PCR技术对其扩增．
    （2）构建重组质粒后导入大肠杆菌中，在筛选重组质粒的培养基上，由于Lac Z基因编码的酶能使无色的X-gal变为蓝色，若大肠杆菌菌落显蓝色，说明导入的是不含目的基因的空白质粒．若大肠杆菌菌落显白色，说明Lac Z基因被破坏，不能编码相应的酶，所以导入的是重组质粒．没有导入任何外源DNA的大肠杆菌不含氨苄青霉素抗性基因，所以不能在该培养基上生存．
    （3）根据BamHⅠ和BlgⅡ两种酶识别的序列为G↓GATCC、A↓GATCT．质粒上存在BamHI的切割位点，假设用a和b表示．目的基因上存在BamHⅠ和BlgⅡ两种酶的酶切位点，假设分别用c和d表示．那么目的基因与质粒链接的方式可能有两种，如图所示：

    用BamHⅠ切割和EcoRⅠ切割成功连接后的产物，获得了长度为0.7kb、2.8kb、1kb和2.5kb四种长度的DNA片段．
    ①如果BamHⅠ切割ac处，可能的情况如图：

    ②如果BamHⅠ切割ac处，可能的情况如图，

    据图比较可推断出目的基因的长度为1.8Kb．
    故答案为：
    （1）X-gal    氨苄青霉素     限制酶、DNA连接酶     PCR
    （2）不含目的基因的空白质粒   重组质粒    不能
    （3）1.8

    点评 本题结合重组质粒形成示意图，考查基因工程的相关知识，重点考查基因工程的步骤，要求考生识记基因工程的步骤，掌握重组质粒的筛选方法，能运用所学的知识，结合题图，判断导入重组质粒的大肠杆菌能否在相应的培养基中生存．

    练习册系列答案
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    科目：高中生物 来源： 题型：解答题

    19．如图所示表示人体某组织的一部分，据图回答问题：
    （1）写出图中字母代表的体液的名称：B组织液，D淋巴．
    （2）以上B、C、D合称细胞外液，A、B、C、D合称体液．
    （3）人体内的细胞通过内环境才能与外界环境间接地进行物质交换，而内分泌系统和神经系统对新陈代谢起着调节作用．

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    科目：高中生物 来源： 题型：解答题

    17．为研究淹水时KNO3对甜樱桃根呼吸的影响，设四组盆栽甜樱桃，其中一组淹入清水，其余三组分别淹入不同浓度的KNO3溶液，保持液面高出盆土表面，每天定时测定甜樱桃根有氧呼吸速率，结果如图所示．请回答：
    （1）细胞有氧呼吸生成CO2的场所是线粒体基质．
    （2）图中结果显示，淹水时KNO3对甜樱桃根有氧呼吸速率降低有减缓作用，其中30mmol•L-1的KNO3溶液作用效果最好．
    （3）淹水缺氧使地上部分和根系的生长均受到阻碍，地上部分叶色变黄，叶绿素含量减少，使光反应为暗
    反应提供的[H]和ATP减少；根系缺氧会导致根细胞无氧呼吸增强，实验过程中能否改用CO2作为检测有氧呼吸速率的指标？请分析说明不能，因为无氧呼吸可能会产生CO2．

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    科目：高中生物 来源： 题型：解答题

    14．“水稻一黑线姬鼠一黄鼬”是某农田生态系统中的一条主要食物链．请回答：
    （1）水稻在生态系统成分中属于生产者．在正常情况下，水稻、黑线姬鼠和黄鼬的数量可通过负反馈（填“正反馈”或“负反馈”）调节方式保持相对稳定．
    （2）鼠害大爆发时，黑线姬鼠数量迅速增长，当达到或超过环境容纳量（K值）时，黑线姬鼠的数量停止增长或作上下波动．
    （3）用药物灭鼠是快速控制鼠类的有效措施，但灭鼠药也会对其他生物产生一定的危害．这种危害既包括其他生物直接取食灭鼠药的危害，也包括有害成分通过食物链积累和富集即生物放大作用所造成的危害．
    （4）若该农田被废弃后，杂草丛生，多年后各种灌木生长起来，该农田的群落演替类型属于次生演替．与原农田相比，演替后群落的生物多样性增加（填“增加”、“减少”或“不变”）．

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    科目：高中生物 来源： 题型：选择题

    1．人肝细胞合成的糖原储存在细胞内，合成的脂肪不储存在细胞内，而是以VLDL（脂肪与蛋白复合物）形式分泌出细胞外．下列叙述正确的是（　　）
    A．VLDL的合成与核糖体无关
    B．VLDL以自由扩散方式分泌出细胞外
    C．肝细胞内糖原的合成与分解可影响血糖含量
    D．VLDL分泌出细胞外依赖于细胞膜的选择透过性

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    科目：高中生物 来源： 题型：选择题

    11．下列有关动物细胞培养的叙述，正确的是（　　）
    A．动物细胞培养过程中，可用胃蛋白酶处理使细胞分散开
    B．通过动物细胞培养获得大量细胞，可证明动物细胞具有全能性
    C．动物细胞培养技术是其他动物细胞工程技术的基础
    D．动物细胞培养选用的培养材料大多是动物的受精卵

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    科目：高中生物 来源： 题型：选择题

    18．层粘连蛋白是由一条重链（A链）和两条轻链（B1、B2链） 构成的高分子糖蛋白，层粘连蛋白结构示意图如上图，若该蛋白由m个氨基酸构成，下列有关说法不正确的有（　　）
    ①该层粘连蛋白含有肽键数为m-3
    ②该蛋白在细胞识别中具有重要作用
    ③癌细胞膜表面层粘连蛋白减少
    ④该物质的合成只需核糖体即可完成．
    A．0项B．一项C．两项D．三项

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    科目：高中生物 来源： 题型：选择题

    15．棉铃虫是严重危害锦花的一种害虫，科研工作者发现了毒蛋白基因B和胰蛋白酶抑制剂基因D，两种基因均可导致棉铃虫死亡，现将B和D基因同时导入锦花的一条染色体上获得一抗虫棉．棉花的短果枝由基因A控制，研究者获得了多个基因型为AaBD的短果枝抗虫棉植株，AaBD植糠自交得到F1（不考虑减数分裂时的交叉互换）．下列说法错误的是（　　）
    A．若F1中短果枝抗虫：长果枝不抗虫=3：1，则B、D基因与A基因位于同一条染色体上
    B．若F1中长果枝不抗虫植株比例为$\frac{1}{16}$，则F1产生配子的基因型为AB、AD、aB、aD
    C．若F1表现型比例为9：3：3：1，则果枝基因和抗虫基因分别位于两对同源染色体上
    D．若F1中短果枝抗虫：短果枝不抗虫：长果枝抗虫=2：1：1，则F1配子的基因型为A和aBD

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    科目：高中生物 来源： 题型：填空题

    16．人体激素分子周游全身，与各种细胞接触，但只能识别他们各自的靶细胞．假设人体雄激素和靶细胞的作用机制如图所示，请回答下列问题：
    （1）雄激素的化学本质是脂质，它通过自由扩散的方式进入细胞质中
    （2）根据所学知识推测，人体激素的受体可能存在的场所有细胞质和细胞核
    （3）雄激素进入靶细胞后，与特定的受体分子相结合，形成大分子复合体，并通过核孔进入核内的遗传物质，而引起某些基因转录出一些特异的mRNA，从而发生特异基因产物的合成
    （4）雄激素能够影响人体性器官的分化和发育等，与神经调节相比较，它的凋节的特点是作用范围较神经调节作用速度较缓慢和作用范围较广泛，作用时间比较长．

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