Question

【题目】某种植物甲能抗真菌病，其抗性是由细胞内的几丁质酶基因A决定的。利用基因程将甲的A基因转移到乙植物体内，可提高乙抗真菌病的能力。请回答下列问题：

（1）在获取目的基因时，可从甲的细胞中提取几丁质酶的mRNA，然后合成cDNA。利用mRNA合成cDNA的过程称作________；与甲细胞中的A基因相比，利用mRNA合成的cDNA中不具有________等核苷酸序列。

（2）在利用农杆菌转化法时，需将目的基因插入到Ti质粒的T—DNA中，原因是________：将目的基因插入到T—DNA中用到的工具酶有________。

（3）在获得转基因植物乙后，可利用基因探针来检测乙的细胞中是否存在A基因的转录产物。基因探针指的是________，

（4）实验发现，将携带了A基因的乙植株体细胞进行离体培养，会获得具有抗真菌病能力的完整植株。上述离体培养过程称为________。植物细胞发育成完整植株的潜能称作________，其原因是________。

Answer 1

【答案】逆转录 启动子、内含子、终止子 T—DNA可转移到植物细胞中，并能整合到染色体单链DNA上 限制酶和DNA连接酶 用放射性同位素标记的含A基因的单链DNA片段 （植物）组织培养 细胞的全能性 分化后的植物细胞中具有形成完整植株的全部基因

【解析】

基因工程的基本操作步骤主要包括四步：①目的基因的获取； ②基因表达载体的构建；③将目的基因导入受体细胞；④目的基因的检测与鉴定。

（1）根据题意分析，上述人工合成cDNA的过程是以RNA为模板合成DNA的过程，为逆转录过程；与A基因相比，人工合成的cDNA中不含启动子、终止子和内含子。

（2）农杆菌细胞中的Ti质粒上的T-DNA（可转移DNA）能进入植物细胞并整合到植物细胞染色体DNA上，因此在利用农杆菌转化法转基因时，需将目的基因插入到质粒的T-DNA中，基因表达载体的构建常需要使用限制酶和DNA连接酶。

（3）为了检测乙的细胞中是否存在A基因的转录产物，可使用放射性标记的含A基因的单链DNA片段做基因探针。

（4）将携带了A基因的乙植株体细胞离体培养成完整的植株的过程为植物组织培养，利用了植物细胞的全能性，依据的原理的是分化后的植物细胞中具有形成完整植株的全部基因。