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    18．由于人突变细胞中含胸苷激酶（TK）而缺乏HGPRT酶，小鼠正常细胞中含HGPRT酶而缺乏TK，两种细胞均不能在HAT培养基中生长，但可在普通培养基中生长．利用上述两类细胞融合获得杂种细胞，在杂种细胞传代过程中，鼠的染色体被保留下来，人的染色体随机丢失，以至最后只剩一条或几条人染色体（如图，图中数字代表保留的人染色体编号）．科研人员运用这一方法确定了胸苷激酶基因所在的染色体．分析回答：

    （1）与植物原生质融合过程相比，过程A特有的诱导方法是用灭活的病毒处理．
    （2）动植物细胞培养过程中，培养液中添加一定量的抗生素的目的是防止杂菌污染，培养箱中充入5…的CO2气体的主要作用是维持培养液适宜的pH．
    （3）若细胞两两融合，则会出现3种类型的融合细胞，过程B用HAT培养基进行培养，其目的是筛选出人鼠融合细胞（或“杂种细胞”）．
    （4）为了使人的全部染色体分别包含于各种不同的人鼠杂交细胞中，人鼠融合细胞应在普通（填“HAT”或“普通”）培养基中传代培养．为检查杂种细胞中含有的人染色体数目和形态，最好选取有丝分裂中期（时期）的杂种细胞进行观察．
    （5）若将某次实验获得的各种人鼠杂种细胞分别在HAT培养基中培养，一段时间后，发现在HAT培养基中只有A、B、C三种杂种细胞能够生长，检查杂种细胞中保留的人染色=体情况如下表（表中“+”表示有相应染色体，“-”表示无相应染色体）：
    杂种细胞　　　　　　　　　　　保留的人染色体
    2号3号5号9号12号17号21号
    A++++-+-
    B-+--++-
    C+-+-+++
    根据表中信息，可推测人细胞中胸苷激酶基因位于17号染色体上．

    分析 1、植物体细胞杂交和动物细胞融合的比较：

    项目细胞融合原理细胞融合方法诱导手段用途
    植物体细胞杂交细胞膜的流动性，（细胞的全能性）去除细胞壁后诱导原生质体融合离心、电刺激、聚乙二醇等试剂诱导克服远缘杂交不亲和，获得杂交植株
    动物细胞融合细胞膜的流动性使细胞分散后，诱导细胞融合离心、电刺激、聚乙二醇、灭活病毒等试剂诱导制备单克隆抗体的技术之一
    2、动物细胞培养的条件：
    （1）无菌、无毒的环境：①消毒、灭菌；②添加一定量的抗生素；③定期更换培养液，以清除代谢废物．
    （2）营养物质：糖、氨基酸、促生长因子、无机盐、微量元素等，还需加入血清、血浆等天然物质．
    （3）温度和PH：36.5℃±0.5℃；适宜的pH：7.2～7.4．
    （4）气体环境：95%空气（细胞代谢必需的）和5%的CO2（维持培养液的PH）．
    3、分析表格：A、B、C三种杂种细胞共有的染色体是17号染色体．

    解答 解：（1）植物原生质体融合的诱导方法有物理法和化学法，而诱导动物细胞融合的方法有物理法、化学法和生物法，因此与植物原生质体融合过程相比，过程A特有的诱导方法是生物法，即用灭活的病毒处理．
    （2）动物细胞培养过程中，培养液中添加一定量的抗生素的目的是防止杂菌污染，培养箱中充入5%的CO2气体的主要作用是维持培养液适宜的pH．
    （3）若细胞两两融合，则会出现3种类型的融合细胞，即人细胞自身融合的细胞、小鼠细胞自身融合的细胞和人鼠细胞融合形成的杂种细胞；过程B用HAT培养基进行培养，目的是筛选出人鼠融合细胞（杂种细胞）．
    （4）突变细胞和正常细胞都不能在HAT培养基上生长，但都能在普通培养基上生长，因此为了使人的全部染色体分别包含于各种不同的人鼠杂交细胞中，人鼠融合细胞应在普通培养基中传代培养．有丝分裂中期，细胞中染色体形态稳定、数目清晰，是观察染色体形态和数目的最佳时期．
    （5）在HAT培养基中只有A、B、C三种杂种细胞能够生长，而A、B、C三种杂种细胞共有的染色体是17号染色体，据此可推知人细胞中胸苷激酶基因位于17号染色体上．
    故答案为：
    （1）用灭活的病毒处理
    （2）防止杂菌污染    维持培养液适宜的pH
    （3）3    筛选出人鼠融合细胞（或“杂种细胞”）
    （4）普通   有丝分裂中期
    （5）17

    点评 本题结合图表，考查动物细胞工程的相关知识，要求考生识记动物细胞融合的方法，能对动植物细胞融合进行比较；识记动物细胞培养的条件，能结合图表中信息准确答题．

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