Question

15．单克隆抗体技术在人类疾病的诊断、治疗方面具有广阔的应用前景．莫罗单抗是美国食品药品监督管理局批准用于肾移植病人防止异体排斥反应的第一只单克隆抗体，该药通过与所有成熟的T细胞相互作用，可有效的抑制淋巴细胞．回答下列问题；
（1）莫罗单抗可通过细胞工程来制各，在诱导细胞融合时，可使用的物理方法有离心、振动、电激（至少答出两种），不同于诱导植物原生质体融合的技术手段是利用灭活的病毒诱导细胞融合．
（2）制各过程中还需用特定的选择性培养基筛选融合细胞，未融合的亲本细胞和融合的具有同种核的细胞均不能生长，只有融合的杂交瘤细胞才能生长，这种细胞的特点是既能迅速大量繁殖，又能产生专一的抗体．
（3）莫罗单抗若通过基因工程来制备，该技术的核心关键是基因表达载体的构建，所用的工具酶是限制性核酸内切酶和DNA连接酶，将目的基因导入动物细胞所采用的技术是显微注射技术．

Answer 1

分析 1、单克隆抗体的制备
（1）制备产生特异性抗体的B淋巴细胞：向免疫小鼠体内注射特定的抗原，然后从小鼠脾内获得相应的B淋巴细胞
（2）获得杂交瘤细胞
①将鼠的骨髓瘤细胞与脾细胞中形成的B淋巴细胞融合；
②用特定的选择培养基筛选出杂交瘤细胞，该杂种细胞既能够增殖又能产生抗体．
（3）克隆化培养和抗体检测
（4）将杂交瘤细胞在体外培养或注射到小鼠腹腔内增殖
（5）提取单克隆抗体：从细胞培养液或小鼠的腹水中提取
2、将目的基因导入受体细胞：根据受体细胞不同，导入的方法也不一样．将目的基因导入植物细胞的方法有农杆菌转化法、基因枪法和花粉管通道法；将目的基因导入动物细胞最有效的方法是显微注射法；将目的基因导入微生物细胞的方法是感受态细胞法．

解答 解：（1）在诱导动物细胞融合时，可使用的物理方法有离心、振动、电激，不同于诱导植物原生质体融合的技术手段是-利用灭活的病毒诱导动物细胞融合．
（2）制各过程中还需用特定的选择性培养基筛选融合细胞，未融合的亲本细胞和融合的具有同种核的细胞均不能生长，只有融合的杂交瘤细胞才能生长，这种细胞的特点是既能迅速大量繁殖，又能产生专一的抗体．
（3）基因工程技术的核心是基因表达载体的构建，所用的工具酶是限制性核酸内切酶和DNA连接酶，将目的基因导入动物细胞所采用的技术是显微注射技术．
故答案为：
（1）离心、振动、电激    灭活的病毒
（2）杂交瘤细胞    既能迅速大量繁殖，又能产生专一的抗体
（3）基因表达载体的构建       限制性核酸内切酶和DNA连接酶   显微注射技术

点评 本题考查动物细胞工程和基因工程的相关知识，要求考生识记动物细胞工程和基因工程的原理及操作步骤，掌握各操作步骤中需要注意的细节问题，能结合所学的知识准确判断各选项．