Question

20．下列有关基因工程的描述准确的是（　　）

• A． EcoRI可识别GAATTC的序列，并在T和C之间切开
• B． 目的基因的获得和质粒的切割要用同种限制酶
• C． DNA连接酶可以使目的基因和质粒的氢键连接
• D． 只要在受体细胞中发现目的基因，即说明实验成功

Answer 1

分析 基因工程技术的基本步骤：
（1）目的基因的获取：方法有从基因文库中获取、利用PCR技术扩增和人工合成．
（2）基因表达载体的构建：是基因工程的核心步骤，基因表达载体包括目的基因、启动子、终止子和标记基因等．
（3）将目的基因导入受体细胞：根据受体细胞不同，导入的方法也不一样．将目的基因导入植物细胞的方法有农杆菌转化法、基因枪法和花粉管通道法；将目的基因导入动物细胞最有效的方法是显微注射法；将目的基因导入微生物细胞的方法是感受态细胞法．
（4）目的基因的检测与鉴定：分子水平上的检测：①检测转基因生物染色体的DNA是否插入目的基因--DNA分子杂交技术；②检测目的基因是否转录出了mRNA--分子杂交技术；③检测目的基因是否翻译成蛋白质--抗原-抗体杂交技术．个体水平上的鉴定：抗虫鉴定、抗病鉴定、活性鉴定等．

解答 解：A、限制酶能够识别双链DNA分子的某种特定核苷酸序列，因此用EcoRI可识别GAATTC的序列，并在G和A之间切开，形成黏性末端，A错误；
B、用同种限制酶切割质粒和目的基因可获得相同的黏性末端，这样便于目的基因插入运载体，B正确；
C、DNA连接酶可以使目的基因和质粒之间连接形成磷酸二酯键，C错误；
D、在受体细胞中发现目的基因，只可说明重组质粒已经进入受体细胞，但不能说明目的基因已成功表达，D错误．
故选：B．

点评 本题考查基因工程的相关知识，要求考生识记基因工程的原理及操作步骤，掌握各步骤中的相关细节，能结合所学的知识准确判断各选项，属于考纲识记和理解层次的考查．