Question

某化工厂的污水池中含有一种有害的难以降解的有机化合物A．研究人员用化合物A、磷酸盐、镁盐以及微量元素配制的培养基，成功筛选到能高效降解化合物A的细菌（目的菌）．实验的主要步骤如图所示．请分析回答下列问题．

（1）培养基中加入化合物A的目的是

 

，这种培养基属于

 

培养基．
（2）“目的菌”生长所需的氮源和碳源是来自培养基中的

 

．
实验需要振荡，培养，由此推测“目的菌”的代谢类型是

 

．
（3）在上述实验操作过程中，获得纯净“目的菌”的关键是

 

．
（4）转为固体培养基时，常采用平板划线的方法进行接种，此过程中所用的接种工具要用

 

灭菌的方法．
（5）实验结束后，使用过的培养基应该进行灭菌处理才能倒掉，这样做的目的是

 

．
（6）某同学计划统计污水池中“目的菌”的总数，他选用10^-4、10^-5、10^-6稀释液进行平板划线，每种稀释液都设置了3个培养皿．从设计实验的角度看，还应设置的一组空白对照实验，目的是

 

．
（7）分离得来的目的菌往往带有一些特殊的基因和蛋白质．
①在获得这些基因的过程中，PCR技术相当重要．PCR扩增反应中加入引物的作用是

 

．
②利用凝胶过滤法分离该特殊蛋白质时（如图），操作中加样的正确顺序是

 

Answer 1

考点：培养基对微生物的选择作用,蛋白质的提取和分离

专题：

分析：分析题干信息，该实验的目的是筛选出高效降解化合物A的细菌，在以化合物A为唯一碳源的培养基中只有能降解化合物A的微生物才能以化合物A为碳源和氮源生长繁殖，不能利用化合物A的微生物因缺乏碳源和氮源，无法生长繁殖；分解化合物A的微生物是需氧微生物，因此在培养过程中应该震荡培养，增加培养液中的溶氧量满足微生物对氧气的需求；微生物分离过程中的关键步骤是无菌技术，防止外来杂菌的污染；对于培养基应该进行高压蒸汽灭菌，彻底杀灭包括芽孢在内的一切微生物，检验培养基灭菌是否彻底的方法是对不接着菌种的空白培养基进行培养，看是否会长出菌落．实验结束时应该将使用过的培养基应该进行灭菌处理才能倒掉，防止污染环境．

解答： 解：（1）培养基中加入化合物A是为分解化合物A的微生物提供碳源和氮源，分离出能分解化合物A的微生物；这中培养基从功能上分属于选择培养基．
（2）分析培养基的配方可知，该培养基由化合物A、磷酸盐、镁盐以及微量元素配制而成，因此化合物A为目的菌提供了碳源和氮源；目的菌是需氧微生物，因此在培养过程中应该震荡培养，增加培养液中的溶氧量满足微生物对氧气的需求．
（3）获得纯净“目的菌”的关键是无菌技术，防止外来杂菌入侵．
（4）平板划线操作的工具是接种环，对于接种环的灭菌方法应该是灼烧灭菌．
（5））实验结束后，使用过的培养基应该进行灭菌处理才能倒掉，防止造成环境污染．
（6）实验设计过程应遵循对照原则，该实验还应增设一组不接种的空白培养基作为对照，以证明培养基制备是否被杂菌污染．
（7）①PCR扩增反应中加入引物的作用是使DNA聚合酶能够从引物的3′端开始连接脱氧核苷酸，提供DNA延伸起始位点．
②利用凝胶过滤法分离该特殊蛋白质时，操作的正确顺序应为图中的④①②③．
故答案为：
（1）筛选目的菌   选择   
（2）化合物A  异养需氧型   
（3）防止外来杂菌入侵    
（4）灼烧       
（5）防止造成环境污染   
（6）证明培养基制备过程中是否被杂菌污染
（7）①结合在模板DNA上，提供DNA延伸起始位点   ④①②③

点评：本题的知识点是微生物的选择培养、培养基的成分和制备，常用接种方法和灭菌方法，主要考查运用所学知识解决实际问题的能力．