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    4．内皮素（ET）是一种含21个氨基酸的多肽，具有强烈的血管收缩和促进平滑肌细胞增殖等作用，其功能异常与高血压、糖尿病、癌症等有着密切联系．内皮素（ET）主要通过与靶细胞膜上的ET受体（ETA）结合而发挥生物学效应．科研人员通过构建表达载体，实现ETA基因在大肠杆菌细胞中的高效表达，其过程如下图所示，图中SNAP基因是一种荧光蛋白基因，限制酶ApaI的识别序列为，限制酶XhoI的识别序列为      ．请据图分析回答：

    （1）进行过程①时，需要加入缓冲液、引物、脱氧核苷酸和逆转录酶酶等．完成过程①②③的目的是获取目的基因（ETA基因）．
    （2）过程③和⑤中，限制酶XhoI切割DNA，使磷酸二酯键键断开，形成的黏性末端是．用两种限制酶切割•获得不同的黏性末端，其主要目的是使目的基因定向连接到载体上，以防止目的基因自身环化_．
    （3）构建的重组表达载体，目的基因上游的启动子是RNA聚合酶识别和结合的部位，驱动基因的转录的部位，进而可驱动基因的转录．除图中已标出的结构外，基因表达载体还应具有的结构是复制原点、终止子．
    （4）过程⑥要CaCl2预先处理大肠杆菌，使其成为容易吸收外界DNA的感受态细胞．
    （5）将SNAP基因与ETA基因结合构成融合基因，其目的是有利于检测检测ETA基因能否表达及表达量．
    （6）基因工程操作时可将外源基因整合到叶绿体基因组中，不仅能有效改良植物的品质．还由于叶绿体转基因不会随花粉（“花粉”或“卵细胞”）传给后代，从而在一定程度上避免转基因作物中的外源基因能扩散到其他同类作物．

    分析 根据题意和图示分析可知：①②③表示反转录法获得目的基因的过程，④表示构建基因表达载体，⑤表示限制酶切割质粒，⑥表示重组质粒导入受体细胞，⑦表示目的基因的检测．

    解答 解：（1）过程①以mRNA合成目的基因，所以需要加入缓冲液、原料、逆转录酶和ATP和引物等．过程①②③表示反转录法获得目的基因的过程．
    （2）过程③和⑤利用限制酶XhoⅠ切割DNA获得目的基因的过程，限制酶使得DNA的磷酸二酯键断开，形成的黏性末端是．图中显示利用了两种限制酶切割目的基因和载体，从而获得了不同的黏性末端，可以使目的基因定向连接到载体上，以防止目的基因自身环化．
    （3）目的基因上游的启动子的作用是RNA聚合酶识别和结合的部位，驱动基因的转录，除图示结构外，完整的基因表达载体还应具有复制原点、终止子等结构．
    （4）过程⑥中，要用CaCl2预先处理大肠杆菌，使其成为处于容易吸收外界DNA的感受态的细胞．
    （5）利用SNAP基因与ETA基因结合构成融合基因，目的是检测ETA基因能否表达及表达量．
    （6）基因工程操作时可将外源基因整合到叶绿体基因组中，不仅能有效改良植物的品质．还由于叶绿体转基因不会随花粉传给后代，从而在一定程度上避免转基因作物中的外源基因能扩散到其他同类作物．
    故答案为：
    （1）逆转录酶    获取目的基因（ETA基因）
    （2）磷酸二酯键     使目的基因定向连接到载体上，以防止目的基因自身环化
    （3）RNA聚合酶识别和结合的部位，驱动基因的转录       复制原点、终止子 
    （4）感受态
    （5）检测ETA基因能否表达及表达量
    （6）花粉

    点评 本题考查基因工程的相关知识，意在考查学生的识图能力和判断能力，要求考生识记基因工程的原理及操作步骤，能结合图中信息并运用所学知识综合分析问题和解决问题的能力．

    练习册系列答案
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    科目：高中生物 来源： 题型：选择题

    17．下列关于正常人血糖调节的叙述，错误的是（　　）
    A．胰高血糖素能促进肝糖原的分解和脂肪等非糖物质的转化
    B．胰岛素能促进组织细胞加速摄取、利用和储存葡萄糖
    C．饥饿时，胰岛A细胞分泌胰高血糖素增加
    D．胰岛素分泌增加使胰高血糖素分泌减少，体现激素的分级调节

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    科目：高中生物 来源： 题型：解答题

    18．某研究小组在夏季某晴朗的一天对一个密闭蔬菜大棚中的某种气体的含量进行了24小时的检测，结果如图1．图2表示该大棚中蔬菜叶肉细胞内两种细胞器间的气体关系的图解．请回答下列问题：

    （1）图1中所测气体为氧气．该大棚内的蔬菜经过一昼夜后是否积累有机物？是（填“是”或“否”）．
    （2）EC段与前一阶段相比，其叶肉细胞内的C3含量的变化趋势是减少（降低）．
    （3）图1中光合作用强度等于呼吸作用强度的点是B、E．对应图1中的DB段，图2中应该进行的气体转移途径有acde（以上均用图中字母表示）．
    （4）如图2所示，在氧气不足条件下，线粒体内丙酮酸氧化分解的速率将会减慢（下降）．适宜光照条件下，光反应产生的并能够为暗反应所利用的能源物质是ATP（或ATP和NADPH）．该植物细胞把暗反应产物转变成丙酮液的场所是细胞质基质．
    （5）大棚蔬菜一天中有机物积累量最大是在图1中的B点（用图中字母表示），若要进一步提高大棚蔬菜的产量，可采取的措施是夜间适当降低温度．

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    科目：高中生物 来源： 题型：选择题

    15．下列有关高中生物实验中酸、碱性物质应用的说法，错误的是（　　）
    A．浓硫酸为橙色重铬酸钾溶液与酒精的反应提供酸性条件
    B．配制斐林试剂时NaOH为CuSO4与还原糖反应提供碱性条件
    C．用盐酸处理口腔上皮细胞有利于甲基绿、吡罗红进入细胞进行染色
    D．观察根尖细胞有丝分裂时用盐酸和酒精混合液使细胞相互分离

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    科目：高中生物 来源：2014-2015学年湖北枣阳白水高级中学高二下学期期中考试生物试卷（解析版） 题型：选择题

    在提取玫瑰精油时，为了使油水混合物分层，应向乳化液中加入（ ）

    A．无水Na2SO4 B．NaCl

    C．MgCl2 D．水

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    9．用脱落酸（ABA）溶液处理培养在含一定浓度蔗糖的培养基中的水稻愈伤组织，实验数据如图甲、乙所示．有关叙述正确的是（　　）
    A．在处理初期ABA促进愈伤组织中淀粉酶的合成
    B．在处理笫7-14天时实验组中较多的淀粉水解成还原糖
    C．在处理第1-3天时ABA促进还原糖产生
    D．植株用ABA处理更有利于光合产物的形成

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    科目：高中生物 来源： 题型：选择题

    16．下列各项物质中，都能体现细胞分化特征的是（　　）
    A．性激素、血红蛋白B．mRNA、tRMAC．唾液淀粉酶、磷脂D．DNA、DNA聚合酶

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    13．雾霾引发了全国人民的关注和讨论；天津港火灾爆炸事故遗址已彻底清理建设海港生态公园，生态环境保护已经成为社会关注的热点．请回答下列问题：
    （1）陕西榆林为产煤大市，矿区生态破坏严重，矿区废弃地的生态恢复工程的关键在于植被恢复与土壤微生物群落的重建，具体实施的措施有人工制造表土、多层覆盖（任答两点）．
    （2）某生态工程以沼气工程为中心，各类植物的秸杆、枝叶用来生产饲料喂养畜、禽、鱼，人、畜、禽粪便作为原料生产沼气，沼渣水返还农田、菜园、果园、苗圃、渔塘，体现了生态工程的物质循环再生原理．该生态工程建设中，鱼塘中每一种鱼苗的投放量都不宜超过其环境容纳量．
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    C．把裸露的坡地建成生态坡地，说明人类活动可改变演替的速度
    D．植被覆盖可有效防止坡地水土流失，体现了生物多样性的间接价值

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