Question

2．为了调查某河流的水质状况，某研究小组测定了该河流水样中的细菌含量，并进行了细菌的分离等工作．回答下列问题：
（1）该小组采用下列图示方法统计样品活菌数目，该方法叫做稀释涂布平板法，主要包括梯度稀释操作和涂布平板操作．在接种前，随机取若干灭菌后的空平板先行培养了一段时间，这样做的目的是检测培养基平板灭菌是否合格．
（2）将1mL水样按下图进行操作，从稀释倍数为10⁶的试管取样在3个平板上分别接入0.1mL稀释液；经适当培养后，3个平板上的菌落数分别为39、38和37．据此可得出每升水样中的活菌数为3.8×10¹¹．当样品的稀释度足够高时，培养基表面生长的一个菌落，来源于样品稀释液中的1个活菌，一般选择菌落数在30～300的平板进行计数．
（3）图中选择了10⁴、10⁵、10⁶、10⁷倍的稀释液进行平板培养，这些平板需要在30～37℃温度下、pH调至中性或微碱性培养1-2d
（4）该4小组采用平板划线法分离水样中的细菌．操作时，接种环通过灼烧灭菌，在第二次及以后划线时，总是从上一次的末端开始划线．这样做的目的是将聚集的菌体逐步稀释以便获得单个菌落．
（5）该小组将得到的菌株接种到液体培养基中并混匀，一部分进行静置培养，另一部分进行振荡培养．结果发现：振荡培养的细菌比静置培养的细菌生长速度快．分析其原因是：振荡培养能提高培养液的溶解氧的含量，同时可以使菌体与培养液充分接触，提高营养物质的利用率．

Answer 1

分析 本题是对微生物实验室培养过程中对实验用品进行灭菌常用的方法及检测培养基灭菌是否彻底的方法、估算样品中菌株数的方法、微生物常用的接种方法和具体操作步骤的综合性考查，回忆微生物实验室培养过程中对实验用品进行灭菌常用的方法及检测培养基灭菌是否彻底的方法、估算样品中菌株数的方法、微生物常用的接种方法和具体操作步骤，然后解答问题．

解答 解：（1）据图分析，图中使用的是稀释涂布平板法接种和计数的，该方法包括菌液的梯度稀释和涂布平板接种操作．在接种前，为检测培养基平板灭菌是否合格需要随机取若干灭菌后的空平板先行培养一段时间，观察有无菌落形成．
（2）根据题意，每升水样中的活菌数为（37+38+39）÷0.1×1000×10⁶=3.8×10¹¹个．平板上的单菌落来源于样品稀释液中的1个活菌．计数时一般选择菌落数在30～300的平板进行计数．
（3）细菌的最适生长温度为30～37℃，pH调至中性或微碱性，培养1-2d．
（4）接种时，接种环需要进行灼烧灭菌．在第二次及以后的划线时，总是从上一次划线的末端开始划线的目的是；将聚集的菌体逐渐稀释分散以便获得由单个细胞繁殖而来的菌落．
（5）由题意可知，振荡培养比静置培养的细菌生长速度快，由此可以说明该细菌是需要菌，由于振荡培养提高培养液中溶解氧的含量，同时可使菌体与培养液充分接触，提高营养物质的利用率，细菌生长速度加快．
故答案为：
（1）稀释涂布平板  梯度稀释  涂布平板  检测培养基平板灭菌是否合格　
（2）3.8×10¹¹　1个活菌   30～300　
（3）30～37℃中性或微碱性  
（4）灼烧   将聚集的菌体逐步稀释以便获得单个菌落　
（5）溶解氧　营养物质

点评 本题考查微生物培养，意在考查考生识记所列知识点，并能运用所学知识做出合理的判断或得出正确的结论的能力．