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    8．重叠延伸PCR技术是一种通过寡聚核苷酸链之间重叠的部分互相搭桥、互为模板，通过多次PCR扩增，从而获得目的基因的方法．该技术在扩增较长片段的DNA、不同来源的DNA片段拼接、基因的定点诱变等方面具有广泛的应用前景．图是利用重叠延伸PCR技术扩增某目的基因的过程．其主要没计思路是用具有互补配对片段的引物（图中引物2、引物3），分别PCR，获得有重叠链的两种 DNA片段，再在随后的扩增反应中通过重叠链的延伸获得目的基因．结合所学知识，分析下列问题．

    （1）引物中G+C的含量影响着引物与模板DNA结合的稳定性，引物中G+C的含量越高，结合稳定性越高．
    （2）在第一阶段获得两种具有重叠片段DNA的过程中，必须将引物l、2和引物3、4置于不同反应系统中，这是因为引物2和3中存在互补配对片段，置于同一反应系统时它们会发生结合而失去作用．
    （3）若在引物l和引物2组成的反应系统和引物3、引物4组成的反应系统中均复制一次，共产生3种双链DNA分子．
    （4）在引物1、引物2组成的反应系统中，经第一阶段形成图示双链DNA至少要经过2 次复制．
    （5）若利用微生物扩增该目的基因，其基本步骤包括：目的基因与载体结合、将重组DNA导入受体细胞、微生物的筛选和培养、从菌群中获取目的基因．

    分析 PCR技术进行的条件有：模板DNA、四种脱氧核苷酸、一对引物、热稳定性的DNA聚合酶，所运用的原理为DNA分子的复制，遵循碱基互补配对原则．而在DNA分子中C-C之间有三个氢键，能增强DNA分子结构的稳定性．

    解答 解：（1）由于C-C之间有三个氢键，而A-T之间有两个氢键，所以引物中C+C含量越高，引物与模板DNA的结合就越稳定．
    （2）从图中可以看出，引物2和引物3相应的碱基之间可以进行配对，所以如果将引物2和3放在一个反应系统中，则会引起引物2和3的失效．
    （3）两个反应系统中各自形成两种DNA分子，但由于引物1和引物4形成两个与原DNA相同的DNA分子，所以含有引物1和4的DNA属于同一种DNA，故总共形成三种DNA分子．
    （4）第一次复制形成的两个DNA分子分别含有引物1和引物2，图中第一阶段形成的DNA分子同时具有引物1和引物2，图示双链DNA分子至少要经过第二次复制才能形成．
    （5）利用微生物扩增该目的基因，需要将目的基因导入受体细胞，而导入受体细胞首先要将目的基因与载体结合．
    故答案为：
    （1）越高  
    （2）引物2和3中存在互补配对片段，置于同一反应系统时它们会发生结合而失去作用
    （3）3   
    （4）2   
    （5）目的基因与载体结合       将重组DNA导入受体细胞

    点评 本题考查基因工程的相关知识，意在考查考生的分析能力、从题中获取有效信息的能力、理解所学知识要点，构建相应知识框架的能力，难度适中．

    练习册系列答案
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    科目：高中生物 来源： 题型：选择题

    1．对于“探究培养液中酵母菌种群数量的动态变化”实验，下列有关分析错误的是（　　）
    A．实验过程中酵母菌的计数属于抽样调查
    B．实验初期装有酵母菌的试管中酵母菌代谢旺盛，细胞周期短
    C．酵母菌芽体的形成与细胞核密切相关
    D．方格线上的酵母菌计数由”左线和上线”改为”右线和下线”时误差增大

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    科目：高中生物 来源： 题型：选择题

    19．下列过程发生在减数分裂的不同时期，正确的顺序是（　　）
    ①联会           ②同源染色体分离            ③四分体形成
    ④着丝点分裂     ⑤四分体排列在赤道板上      ⑥染色体复制．
    A．①②③④⑤⑥B．⑥③①⑤④②C．⑥①③⑤②④D．①⑥③⑤②④

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    科目：高中生物 来源： 题型：选择题

    16．下列不符合伴X染色体隐性遗传病的叙述是（　　）
    A．患病家系中不一定代代有患者
    B．男性患病率高于女性
    C．女性携带者的致病基因来自父亲，男性患者的致病基因来自母亲
    D．如果一个家庭生有一个伴X染色体隐性遗传病的女儿，则该家庭的双亲中至少有一个是患者（不考虑突变）

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    科目：高中生物 来源： 题型：选择题

    3．下列对生物技术的理解，合理的是（　　）
    A．基因工程的核心是提取目的基因
    B．用胚胎分割移植技术可获得性别不同的同卵双胞胎
    C．体细胞核移植技术可用于人类疾病的治疗
    D．动物细胞培养一般都能传到40〜50代，但其遗传物质均发生了改变

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    科目：高中生物 来源： 题型：解答题

    13．人体内环境的维持，依赖于各个器官、系统的协调活动，而信息分子是它们之间的“语言”．请结合图回答（1）至（3）题．

    （1）图中①表示免疫系统；“甲”表示增殖分化，产生浆细胞和记忆细胞．体内蛋白质合成不足可能会导致抗体数量减少和血浆渗透压下降，从而使机体出现免疫力下降、组织水肿．
    （2）当人紧张时，体内肾上腺素分泌增加，直接作用于肾上腺细胞的信息分子“丙”是来自神经元分泌的神经递质，完成该反射的结构基础是反射弧．
    （3）由上图可知，神经-体液-免疫 调节网络是机体维持稳态的主要调节机制．
    （4）如图是甲状腺激素分泌调控模式图，主要包括①至⑤五个过程，其中TRH及TSH分别表示促甲状腺激素释放激素和促甲状腺激素．请回答下列问题：
    （i）人体长期缺碘将会导致甲状腺增生（俗称大脖子病），这是图中③④⑤过程减弱，过程①②增强的结果（填编号）．
    （ii）有一种疾病是体内产生了大量TSH受体的抗体，该抗体可以结合TSH受体而充当TSH的作用，从而引起甲状腺激素增多．

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    科目：高中生物 来源： 题型：选择题

    20．某种动物中，其毛色黄色基因A对灰色基因a为显性，短毛基因B对长毛基因b为显性，且基因A或b在纯和时使胚胎致死，这两对基因是独立遗传的．现有两只双杂合的黄色短毛的动物交配，理论上所产生的子代的表现型及基因型比例为（　　）
    A．2：1；  4：2：2：1B．3：1；      9：3：3：1
    C．3：2：2；1：1：1：1D．4：2：2：1；  9：3：3：1

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    科目：高中生物 来源： 题型：解答题

    17．请据题回答：
    （1）绵阳安县是重要的蚕桑基地，雄蚕含有两个同型的性染色体ZZ，雌蚕含有两个异型的性染色体ZW．家蚕中D、d基因只位于Z染色体上，Zd使雌配子致死，能（能或不能）选择出相应基因型的雌雄蚕杂交，使后代只有雌性．
    （2）在赫尔希和蔡斯的噬菌体侵染细菌实验中，用32P标记的噬菌体侵染大肠杆菌，在理论上，上清液中不含放射性，下层沉淀物中具有很高的放射性；而实验的实际最终结果显示：在离心上层液体中，也具有一定的放射性，而下层的放射性强度比理论值略低．赫尔希和蔡斯在噬菌体侵染细菌实验中，采用的实验方法是同位素标记法（同位素示踪法）．
    在理论上，上清液放射性应该为0，其原因是：理论上讲，噬菌体已将含32P的DNA全部注入大肠杆菌内，上清液中只含噬菌体的蛋白质外壳．
    由于实验数据和理论数据之间有较大的误差，由此对实验过程进行误差分析：
    a．在实验中，从噬菌体和大肠杆菌混合培养，到用离心机分离，这一段时间如果过长，会使上清液的放射性含量升高，其原因是：噬菌体在大肠杆菌内增殖后释放出来，经离心后分布在分布在上清液中．
    b．在实验中，如果有一部分噬菌体没有侵染到大肠杆菌细胞内，将是（填“是”或“不是”）误差的来源．

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    16．关于基因在染色体上的说法正确的是（　　）
    A．萨顿利用类比推理法证明了基因在染色体上
    B．萨顿通过果蝇的白眼和红眼这一相对性状，提出基因在染色体上的假说
    C．摩尔根利用假说-演绎法，通过实验提出基因在染色体上的假说
    D．同一条染色体上不存在等位基因

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