烟草由于受烟草花叶病毒的侵染而减产.我国科学家利用基因工程技术成功培育出抗烟草花叶病毒的烟草.下图是转基因烟草培育过程示意图. 请同答: (1)引物I.II是根据的脱氧核苷酸序列合成.从理论上推测.该DNA分子通过PCR扩增三次.产物中含有引物I的DNA片段所占的比例为 . (2)过程①表示 .Ti质粒至少需含有一个至多个位点.以� 题目和参考答案——青夏教育精英家教网—

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（7分）烟草由于受烟草花叶病毒的侵染而减产，我国科学家利用基因工程技术成功培育出抗烟草花叶病毒的烟草。下图是转基因烟草培育过程示意图。

请同答：

（1）引物I、II是根据的脱氧核苷酸序列合成。从理论上推测，该DNA分子通过PCR扩增三次，产物中含有引物I的DNA片段所占的比例为。

（2）过程①表示。Ti质粒至少需含有一个至多个位点，以供抗烟草花叶病毒基因插入其中构建基因表达载体。

（3）过程②表示，需在人工控制条件下，将烟草细胞通过过程形成愈伤组织，最终形成完整植株。该技术所依据的原理是。

【答案】

（7分）（每空1分）

(1)抗烟草花叶病毒基因（或目的基因） 7/8

（2）将基因表达载体（或将含抗烟草花叶病毒基因的重组Ti质粒）转入农杆菌(或将目的基因导入受体细胞)限制酶切割（或限制性核酸内切酶切割，答“限制性内切酶切割”不给分）

（3）植物组织培养脱分化植物（体）细胞的全能性

【解析】

试题分析：（1）由图可知，引物是与抗烟草花叶病毒基因的DNA片段进行配对，所以应根据抗烟草花叶病毒基因的脱氧核苷酸序列合成；由于DNA复制是半保留复制，整个复制过程中，第一次使用引物Ⅱ的链最后不会出现引物Ⅰ的DNA片段，所以出现的为7个DNA分子，故概率为7/8.（2）过程①表示将目的基因导入受体细胞。质粒上要具有一个或多个限制酶切割位点。（3）过程②表示植株形成过程，该过程利用了植物组织培养，通过脱分化形成愈伤组织，植物组织培养的原理是植物细胞具有全能性。

考点：本题考查基因工程，意在考查考生识记所列知识点，并能运用所学知识做出合理的判断或得出正确的结论的能力。

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（1）为确定烟草花叶病毒的遗传物质，实验设计思路是首先将病毒的蛋白质外壳与RNA分离，然后________，如果实验结果是________，则可以推测烟草花叶病毒的遗传物质是RNA。

（2）科学家还进行了著名的植物病毒重建实验，再次证明烟草叶病毒的遗传物质是RNA。实验过程如图所示。

用杂合病毒去感染烟草，甲、乙烟叶上出现的分别为________的病斑和________的病斑，从感染后的两组烟草细胞中均分离提纯得到了完整的病毒。请画出分离得到的病毒的模式图。

（3）研究人员利用转基因技术培育出了抗TMV的烟草，主要流程如图所示。

图中过程①表示________，经过程②获得的目的基因两侧除应含有相关________的酶切位点外，目的基因的两端还必须有________。由图分析，构建的重组质粒上含有的标记基因是________基因。过程⑤采用的是________技术，培养基中除含有卡那霉素及植物必需的各种营养成分外，还必须添加________，以保证受体细胞能培养再生成植株。过程⑥可采取________的方法，检测植株是否合成了相关蛋白。在个体水平的鉴定过程中，可通过________的方法来确定植株是否具有抗性。

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科目：高中生物 来源：2013届浙江台州中学高二下学期期中考试理科生物试卷（解析版） 题型：选择题

下列有关科学实验研究的叙述中，错误的是　

	实验材料	实验过程	实验结果与结论
A	R型和S型肺炎双球菌	将R型菌与S型菌的DNA与DNA水解酶混合培养	只生长R型菌，说明可能是由于S型菌的DNA被水解后失去遗传效应
B	噬菌体和大肠杆菌	用含³⁵S标记的噬菌体去感染普通的大肠杆菌，短时间保温后搅拌	离心获得的上清液中放射性很高，说明DNA是遗传物质
C	烟草花叶病毒和烟草	用从烟草花叶病毒中分离出的RNA侵染烟草	烟草受到感染出现病斑，说明烟草花叶病毒的RNA可能是遗传物质
D	大肠杆菌	将已用¹⁵N标记DNA的大肠杆菌培养在普通（¹⁴N）培养基中	经三次分裂后，含¹⁵N的DNA占DNA总数的1/4，可说明DNA分子的复制方式是半保留复制

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科目：高中生物 来源：2013届山东省威海市高二上学期期末考试生物试卷 题型：选择题

下列有关科学实验研究的叙述中，错误的是

	实验材料	实验过程	实验结果与结论
A	R型和S型肺炎双球菌	将R型菌与S型菌的DNA与DNA水解酶混合培养	只生长R型菌，说明可能是由于DNA被水解后失去遗传效应
B	噬菌体和大肠杆菌	用含³⁵S标记的噬菌体去感染普通的大肠杆菌，短时间保温后搅拌	离心获得的上清液中放射性很高，说明DNA是遗传物质
C	烟草花叶病毒和烟草	用从烟草花叶病毒中分离出的RNA侵染烟草	烟草受到感染出现病斑，说明烟草花叶病毒的RNA可能是遗传物质
D	大肠杆菌	将已用¹⁵N标记DNA的大肠杆菌培养在普通（¹⁴N）培养基中	经三次分裂后，含¹⁵N的DNA占DNA总数的1/4，说明DNA分子的复制方式是半保留复制

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(1)质粒是基因工程中常用的载体，质粒是一种裸露的、结构简单、具有自我复制能力的很小的____分子，至少有一个至多个________位点。载体除质粒之外，还可以用______等。
(2)如图是基因的一个片段，切断a处的工具酶是________，切断b处的酶是_______。

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(4)基因表达载体导入烟草细胞常用的方法是_________。
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