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    10．家蚕细胞具有高效表达外源基因的能力．将人干扰素基因导入家蚕细胞并大规模培养，可提取干扰素用于制药．
    （1）进行转基因操作前，需用胰蛋白酶（或胶原蛋白酶）酶短时处理幼蚕组织，以便获得单个细胞．
    （2）为使干扰素基因在家蚕细胞中高效表达，需要把来自cDNA文库的干扰素基因片段正确插入载体质粒的启动子和终止子之间．
    （3）采用PCR技术可验证干扰素基因是否已经导入家蚕细胞．改PCR反应体系的主要成分应该包含：扩增缓冲液（含Mg2+）、水，4种脱氧核糖苷酸、模板DNA、引物 和TaqDNA聚合酶．
    （4）将目的基因导入动物细胞最常用的方法是显微注射．此方法的受体细胞多是受精卵（卵母细胞）．
    （5）将人干扰素基因导入家蚕细胞并大规模培养时需要提供气体环境：95%空气+5%CO2．
    O2是细胞代谢所必需的，CO2的主要作用维持培养液的pH；培养液应进行无菌处理．通常还要在培养液中添加一定量的抗生素，以防培养过程中的杂菌污染．此外，应定期更换培养液，防止代谢产物积累对细胞自身造成危害．

    分析 1、基因工程的基本操作步骤主要包括四步：①目的基因的获取；②基因表达载体的构建；③将目的基因导入受体细胞；④目的基因的检测与表达．从分子水平上检测目的基因的方法：（1）分子水平上的检测：①检测转基因生物染色体的DNA是否插入目的基因--DNA分子杂交技术；②检测目的基因是否转录出了mRNA--分子杂交技术；③检测目的基因是否翻译成蛋白质--抗原-抗体杂交技术．
    2、PCR技术的条件：模板DNA、四种脱氧核苷酸、一对引物、热稳定DNA聚合酶（Taq酶）等．

    解答 解：（1）动物细胞培养时，需要用胰蛋白酶处理动物组织，以便获得单个细胞．
    （2）基因表达载体包括启动子、终止子、目的基因和标记基因，其中启动子位于目的基因的首端，启动基因的转录，终止子位于目的基因的尾端，终止基因的转录，因此需要把来自cDNA文库的干扰素基因片段正确插入载体质粒的启动子和 终止子之间．
    （3）采用PCR技术大量扩增目的基因时，其体系主要包括：扩增缓冲液（含Mg2+）、水，4种脱氧核糖苷酸、模板DNA、耐高温的DNA聚合酶（taq酶）和DNA引物．
    （4）动物细胞工程中，由于受精卵具有全能性，一般选用受精卵作为受体细胞，将目的基因导入受精卵最常用的方法是显微注射．
    （5）将人干扰素基因导入家蚕细胞并大规模培养时需要提供气体环境：95%空气+5%CO2．
    O2是细胞代谢所必需的，CO2的主要作用维持培养液的pH；培养液应进行无菌处理．通常还要在培养液中添加一定量的抗生素，以防培养过程中的杂菌污染．此外，应定期更换培养液，防止代谢产物积累对细胞自身造成危害．
    故答案为：
    （1）胰蛋白酶（或胶原蛋白酶）
    （2）终止子
    （3）TaqDNA聚合酶
    （4）显微注射       受精卵（卵母细胞）
    （5）细胞代谢      维持培养液的pH     抗生素

    点评 本题综合考查基因工程、动物细胞培养等知识，要求考生识记基因工程的原理及操作步骤；识记动物细胞培养的具体过程和条件，能结合所学的知识准确答题．

    练习册系列答案
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    选项管腔中氨基酸→上皮细胞管腔中Na+→上皮细胞上皮细胞中氨基酸→组织液
    A主动运输被动运输主动运输
    B被动运输被动运输被动运输
    C被动运输主动运输被动运输
    D主动运输被动运输被动运输
    A．AB．BC．CD．D

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