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【题目】苯酚及其衍生物广泛存在于工业废水中,对环境有严重危害.小明同学准备依据图1操作步骤,从处理废水的活性污泥中分离筛选酚降解高效菌株.请回答下列问题:

(1)酚降解菌富集培养基含有蛋白胨、K2HPO4、MgSO4、苯酚和水,其中可作为碳源的有___

(2)将采集到的样品接种培养,苯酚用量应随转接次数增加而逐渐__.以达到富集酚降解菌的目的.若图1平板中菌落过于密集,应进一步___________,以便于菌落计数与分离.制备平板培养基时除了需要水、营养物质外,还必须添加 ___________

(3)小明同学利用平板划线法纯化酚降解菌,他在培养基上共划了5个区域,则需要__________次(填数字)灼烧接种环.

(4)采用比色测定法(使用苯酚显色剂)检测降解后的废水中苯酚残留量.先制作系列浓度梯度并进行显色反应,下表中1~5号比色管的苯酚浓度应分别为__________________

管号

1

2

3

4

5

6

苯酚浓度(mg/L)

1

如果废水为50mg/L苯酚溶液,降解后约有21%的苯酚残留,则需将残留液稀释_______(填序号:①5②10③20)倍后,再进行比色.

【答案】 蛋白胨、苯酚 增加 稀释涂布 凝固剂(琼脂) 6 0、0.2、0.4、0.6、0.8

【解析】 稀释涂布平板法和平板划线法接种目的菌进行分离、纯化,前者主要应用于对目的菌进行计数,通过形成菌落来估算,后者仅仅是纯化菌种,但也需要挑选单菌落,所以二者都需要在固体培养基上完成培养。为了防止操作中、操作后造成杂菌污染,所以应注意每个环节中尽可能做到无菌操作,如对接种环的灼烧,在酒精灯的火焰旁进行接种环操作等等

(1)从培养基内的成分来看,只有蛋白胨和苯酚内含有碳元素,因此可以作为碳源。

(2)因为最终要获得的菌株为可以高效降解酚的菌株,所以苯酚的用量应随转接次数增加而逐渐增加;稀释涂布平板法可以分离密集菌落,同时便于菌落的计数;平板培养基为固体培养基,在制备时除应加入的水及其他营养物质后,还需加入凝固剂(琼脂)

(3)用平板划线法纯化目的菌(酚降解菌),为了防止杂菌污染,每次划线前都要进行灼烧接种环,且最后依次划线结束后,为了防止菌种污染环境,还要再次灼烧接种环,所以5次划线,需要灼烧6次接种环

(4)题干中提到要制作系列浓度梯度进行显色反应,共配制了六支比色管,所以六支比色管的浓度值依次分别为0、0.2、0.4、0.6、0.8、1;废水中含有50mg/L 苯酚溶液,降解后剩余21%,则剩余中含有10.5mg/L 苯酚溶液,经过5倍或10倍稀释后分别为2.1mg/L 1.05mg/L ,不在比色区间内,而20倍稀释后浓度为0.5mg/L ,在比色区间内,因此要稀释20倍后再进行比色。

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C. 三倍体×三倍体三倍体 D. 二倍体×六倍体四倍体

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B. 肯定不是抗维生素D佝偻病遗传的家系是甲、丁

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项目

摄食量

粪便量

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能量(kJ)

410

210

130

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B. 昆虫的粪便量属于植物同化的能量

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