下列是关于“微生物接种以及单个菌落观察”实验操作的叙述，其中错误的是（ ）
A．配制牛肉膏蛋白胨固体培养基，经高温、高压灭菌后倒入培养皿备用
B．接种前接种环须经酒精灯火焰灼烧
C．接种时应用无菌刮铲在培养基表面涂匀
D．倒置培养皿，37℃恒温培养48~72小时后观察
科目：高中生物 来源：2013-2014学年上海市杨浦区高考一模生物卷（解析版） 题型：综合题
（9分）回答下列关于微生物的问题。
营养缺陷型是指野生型菌株由于基因突变，致使细胞合成途径出现某些缺陷，丧失合成某些物质的能力，如氨基酸、维生素、碱基等的合成能力出现缺陷，必须在基本培养基（野生型菌株最低营养要求）中添加缺陷的营养物质（补充培养基）才能正常生长的一类突变株。基本培养基中加入一些营养物质，可以满足该微生物的各种营养缺陷型生长的培养基称为完全培养基。营养缺陷型在基础理论研究和生产应用中有广泛作用。青霉素能抑制细菌细胞壁的生物合成，可用于淘汰野生型菌株。筛选营养缺陷型菌株一般通过四个环节，即诱变、淘汰野生型、检出和鉴定营养缺陷型。
1.取新活化枯草芽孢杆菌制备菌悬液，再用紫外线照射处理。下列关于将诱变后存活的个体培养，淘汰野生型菌株的做法和原理，正确的是（多选）
培养在含有青霉素的基本培养基中，淘汰野生型菌株，保留缺陷型菌株
培养在含有青霉素的补充培养基中，淘汰野生型菌株，保留缺陷型菌株
完全培养基中青霉素可以杀死野生型菌株，缺陷型菌株得以生存
补充培养基中缺陷型菌株可以生存，野生型菌株不能生存
基本培养基中野生型可以生长繁殖，青霉素将其杀死
基本培养基中缺陷型不可以生长繁殖，青霉素不能将其杀死
2.在培养皿倒上一层不含菌的基本培养基，待冷凝后加上一层含菌的基本培养基，其后再浇上一层不含菌的基本培养基。经培养后出现菌落，在皿底将菌落标记为A1、A2…，然后在其上再倒一薄层完全培养基，再培养，出现新的菌落，在皿底标记为B1、B2…，则A菌落与B菌落分别较可能是_______________、_______________（均选填野生型/突变型）。
3.将待测菌落处理后涂布于某培养基平板上培养，用灭菌牙签逐个挑取待测菌，先后点接于A培养基和B培养基平板上。前后位置及号码相对应。培养后观察。见图一。为检出营养缺陷型，A、B培养基应分别为__________培养基、__________培养基。菌落（ ）为营养缺陷型。
4.为鉴定上步检出的营养缺陷型是哪种营养缺陷型，将待测菌种悬液涂于图二含有基本培养基的培养皿中，培养皿背面划线标注C、D、E三区。C、D、E为三滤纸片，分别浸有氨基酸混合液、维生素混合液和碱基混合液。培养后观察。当观察到________________________现象，说明是该营养缺陷型。图二培养基也可称为_________培养基。
5.如检测菌为碱基类营养缺陷型，要进一步鉴定是哪种碱基营养缺陷型，可同图二方法加浸该营养物质的滤纸片，如加浸________________的滤纸片。
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