Question

19．图为利用生物技术获得转基因猪和转基因烟草的过程（图中数字表示过程或技术，字母表示物质或结构），据图回答：

（1）为分离提纯苏云金芽孢杆菌，先用LB液体培养基进行扩大培养，再用划线分离（涂布分离）方法进行分离，获得一个个单独的菌落．
（2）在研究过程中，采用PCR（聚合酶链式反应）技术对目的基因进行扩增，然后将目的基因与质粒等载体结合形成了重组质粒．在重组质粒的构建过程中需要的工具酶有限制性核酸内切酶和DNA连接酶．
（3）图中②代表胚胎体外培养 技术．若培养C中的ES细胞，一般在培养皿底部制备一层 胚胎成纤维细胞，目的是促进生长抑制分化．
（4）若在0.5-0.6mol/L的甘露醇溶液环境下用特定的酶处理D，可获得原生质体．若将含有D的培养物放在摇床上，通过液体悬浮 培养可以分散成单细胞，这些单细胞具有胚性 细胞的特征．
（5）使用自然生长的烟草茎进行组织培养，需要依次在70%酒精和5%次氯酸钠溶液中浸泡消毒．各种器皿和培养基等通常用高压蒸汽灭菌法灭菌．
（6）从经特定免疫处理的猪中提取B淋巴细胞，与骨髓瘤细胞 融合，形成杂交细胞，经筛选，克隆培养后，获得的单一细胞的特征是既能产生特异抗体，又能无限增殖．

Answer 1

分析 分析题图：图示为利用生物技术获得生物新品种的过程，其中①表示获取目的基因的过程，则A为目的基因，B为重组DNA分子；②表示早期胚胎培养技术；③表示胚胎移植；④⑤表示植物组织培养过程，D表示愈伤组织，E表示胚状体．

解答 解：（1）苏云金芽孢杆菌可用LB液体培养基进行扩大培养；分离微生物常用平板划线法或稀释涂布平板法，这样可以获得一个个单独的菌落．
（2）PCR（聚合酶链式反应）技术可在体外大量扩增目的基因；构建基因表达载体时，首先需要用同种限制酶切割运载体和含有目的基因的外源DNA分子，其次需要用DNA连接酶将目的基因和运载体连接形成重组质粒．
（3）图中②代表胚胎体外培养技术．若培养C中的ES细胞，一般在培养皿底部制备一层胚胎成纤维细胞，目的是促进生长抑制分化．
（4）若在0.5-0.6mol/L的甘露醇溶液环境下用特定的酶（纤维素酶和果胶酶）处理D，可获得原生质体．若将含有D的培养物放在摇床上，通过液体悬浮培养可以分散成单细胞，这些单细胞具有胚性细胞的特征．
（5）使用自然生长的烟草茎进行组织培养，需要依次在70%酒精和5%次氯酸钠溶液中浸泡消毒．各种器皿和培养基等通常用高压蒸汽灭菌法灭菌．
（6）制备单克隆抗体时，将浆细胞与骨髓瘤融合，经筛选，克隆培养后，获得既能产生特异抗体，又能无限增殖的杂交瘤细胞．
故答案为：
（1）LB液体     划线分离（涂布分离）   菌落
（2）PCR （聚合酶链式反应）   限制性核酸内切酶和DNA连接酶
（3）胚胎体外培养技术促进生长抑制分化
（4）甘露醇    液体悬浮   胚性
（5）5%次氯酸钠     高压蒸汽灭菌
（6）骨髓瘤细胞    既能产生特异抗体，又能无限增殖

点评 本图结合图解，综合考查基因工程、细胞工程、胚胎工程及微生物的相关知识，要求考生识记相关工程技术的原理、操作步骤及应用；识记无菌技术，掌握分离微生物的两种方法，能正确分析题图，再结合所学的知识准确答题．