Question

【题目】流行性感冒（简称流感）是流感病毒引起的急性呼吸道感染疾病。典型的临床症状有急起高热、全身疼痛、显著乏力和轻度呼吸道症状，所引起的并发症和死亡现象非常严重。回答下列相关问题：

（1）可根据_____________原理，用人工标记的抗体检测体内流感病毒的有无。

（2）“病毒核酸检测试剂盒”在快速准确检测病毒方面发挥着重要作用，通过血液等样本获得cDNA的具体过程是_____________。将获得的cDNA通过PCR技术扩增，最后通过荧光标记的基因探针对扩增产物进行检测。利用PCR技术扩增DNA时，需要的条件有_____________（答出3点），PCR技术获取目的基因的优势是___________________________。

（3）疫苗对预防流感具有重要意义，某公司将流感病毒的表面蛋白基因与质粒结合形成基因疫苗，并已完成动物接种实验。接种基因疫苗后，__________（填“病毒的DNA聚合酶”“宿主的DNA聚合酶”或“宿主的RNA聚合酶”）识别表面蛋白基因启动子，最终启动免疫反应。在检测疫苗刺激机体产生免疫能力的实验中，对照组的处理为__________________________，实验组的处理为接种疫苗，一段时间后分别接种流感病毒，并统计两组动物的发病率。

（4）2017年，我国科学家将流感病毒的部分基因进行改造，使其失去在宿主细胞内的增殖能力，并已将该病毒活疫苗进行动物实验。与传统灭活疫苗相比，该类疫苗的优点是可引起_______________（填“体液”或“细胞”）免疫，从而加强免疫效果。

Answer 1

【答案】抗原—抗体杂交 在逆转录酶的作用下，以mRNA为模板，按照碱基互补配对原则合成cDNA 热稳定DNA聚合酶（或Taq酶）、引物、原料、加热 可以在短时间内大量扩增目的基因 宿主的RNA聚合酶 接种不含疫苗的接种物 细胞

【解析】

基因工程技术的基本步骤：

（1）目的基因的获取：方法有从基因文库中获取、利用PCR技术扩增和人工合成。

（2）基因表达载体的构建：是基因工程的核心步骤，基因表达载体包括目的基因、启动子、终止子和标记基因等。

（3）将目的基因导入受体细胞：根据受体细胞不同，导入的方法也不一样.将目的基因导入植物细胞的方法有农杆菌转化法、基因枪法和花粉管通道法；将目的基因导入动物细胞最有效的方法是显微注射法；将目的基因导入微生物细胞的方法是感受态细胞法。

（4）目的基因的检测与鉴定：分子水平上的检测：①检测转基因生物染色体的DNA是否插入目的基因--DNA分子杂交技术；②检测目的基因是否转录出了mRNA--分子杂交技术；③检测目的基因是否翻译成蛋白质--抗原-抗体杂交技术.个体水平上的鉴定：抗虫鉴定、抗病鉴定、活性鉴定等。

（1）利用抗原-抗体杂交的特点，可用人工标记的抗体对检测者体内流感病毒的有无进行检测。

（2）以mRNA为材料可以获得cDNA，其具体过程是在逆转录酶的作用下，以mRNA为模板按照碱基互补配对的原则合成cDNA。利用PCR技术扩增DNA时，需要的条件有热稳定DNA聚合酶（或Taq酶）、引物、原料、加热，PCR技术获取目的基因的优势是可以在短时间内大量扩增目的基因。

（3）病毒不具细胞结构，只能利用宿主细胞的RNA聚合酶识别其启动子。在检测疫苗刺激机体产生免疫能力的实验中，对照组的处理为接种不含疫苗的接种物，实验组的处理为接种疫苗，一段时间后分别接种流感病毒，并统计两组动物的发病率，从而确定疫苗的免疫能力。

（4）上述子代病毒能侵染宿主细胞，与不具有侵染性的流感病毒灭活疫苗相比，该病毒活疫苗的优势之一是可引起细胞免疫，从而加强免疫效果。