Question

【题目】通过基因工程利用小球藻生产人胰岛素能克服利用细菌生产时的诸多不利影响。小球藻可大规模种植，并且所生产的胰岛素可以直接用于医疗和保健，该技术能提高小球藻的药用价值，形成高附加值的生物技术产品，同时也能降低医用蛋白的价格，使人胰岛素的应用得到普及。回答下列问题：

（1）基因工程操作的核心步骤是_______________，其目的是使目的基因在受体细胞中________________，并且可以通过复制遗传给下一代，同时，使目的基因表达和发挥作用。

（2）组成基因表达载体的单体是__________，基因表达载体上的启动子的作用是_____________________。

（3）在生物体外常用PCR技术来扩增目的基因。PCR的原理是__________________________________。在PCR体系中需要加入dNTP（dATP、dTTP、dGTP、dCTP），dNTP脱去两个磷酸后形成的物质能作为DNA合成的原料，则dATP和ATP在组成成分上的差别是___________________，在PCR体系中____________（填“需要”或“不需要”）加入ATP。

Answer 1

【答案】构建基因表达载体 稳定存在 脱氧核苷酸 RNA聚合酶识别和结合的部位，这种结合完成后才能驱动目的基因通过转录合成mRNA DNA的双链复制 构成dATP的是脱氧核糖，构成ATP的是核糖 不需要

【解析】

基因工程技术的基本步骤：

（1）目的基因的获取：方法有从基因文库中获取、利用PCR技术扩增和人工合成。

（2）基因表达载体的构建：是基因工程的核心步骤，基因表达载体包括目的基因、启动子、终止子和标记基因等。

（3）将目的基因导入受体细胞：根据受体细胞不同，导入的方法也不一样.将目的基因导入植物细胞的方法有农杆菌转化法、基因枪法和花粉管通道法；将目的基因导入动物细胞最有效的方法是显微注射法；将目的基因导入微生物细胞的方法是感受态细胞法。

（4）目的基因的检测与鉴定：分子水平上的检测：①检测转基因生物染色体的DNA是否插入目的基因--DNA分子杂交技术；②检测目的基因是否转录出了mRNA--分子杂交技术；③检测目的基因是否翻译成蛋白质--抗原-抗体杂交技术.个体水平上的鉴定：抗虫鉴定、抗病鉴定、活性鉴定等。

（1）基因工程的核心步骤是构建基因表达载体；构建基因表达载体的目的是使目的基因在受体细胞中稳定存在，并且可以通过复制遗传给下一代，同时，使目的基因表达和发挥作用。

（2）基因表达载体的本质是DNA，其基本组成单位是脱氧核苷酸；基因表达载体中的启动子是RNA聚合酶识别和结合的部位，这种结合完成后才能驱动目的基因通过转录合成mRNA。

（3）PCR的原理是DNA的双链复制。在PCR体系中需要加入dNTP（dATP、dTTP、dGTP、dCTP），dNTP脱去两个磷酸后形成的物质能作为DNA合成的原料，则dATP和ATP在组成成分上的差别是构成dATP的是脱氧核糖，构成ATP的是核糖。在PCR体系中不需要ATP。