Question

如图表示我国自主研发的转基因抗虫水稻“华恢1号”主要培育流程，据图回答：

（1）④过程应用的生物技术主要是

 

．
（2）杀虫基因（crylA）是人们根据几种Bt毒蛋白的分子结构设计并人工合成的，这属于

 

工程技术．
（3）若限制酶Ⅱ切割DNA分子后形成的末端为，则该酶识别的核苷酸序列是

 

．
（4）组建理想的载体需要对天然的质粒进行改造．下图是天然土壤农杆菌Ti质粒结构示意图（图示部分基因及部分限制性内切酶作用位点），据图分析：
①人工改造时，要使抗虫基因表达，还应插入

 

．
②人工改造时用限制酶Ⅱ处理，其目的是：第一，去除质粒上的

 

（基因），保证T-DNA进入水稻细胞后不会引起细胞的无限分裂和生长；第二，使质粒带有单一限制酶作用位点，有利于

 

；第三，使质粒大小合适，可以提高转化效率等．
③若用限制酶1分别切割改造过的理想质粒和带有抗虫基因的DNA分子，并构成重组Ti质粒，分别以含四环素和卡那霉素的培养基培养已成功导入抗虫基因的水稻胚细胞，观察到的细胞生长的现象是

 

．
（5）检测“华恢l号”具有抗虫性状的方法是

 

．

Answer 1

考点：基因工程的原理及技术

专题：

分析：1、蛋白质工程--指以蛋白质的结构规律及其与生物功能的关系作为基础，通过基因修饰或基因合成，对现有蛋白质进行基因改造，或制造一种新的蛋白质，以满足人类的生产和生活的需要．蛋白质工程是在基因工程的基础上，延伸出来的第二代基因工程．
2、基因表达载体的组成：目的基因+启动子+终止子+标记基因，是基因工程的核心．使目的基因在受体细胞中稳定存在并且可以遗传给下一代并表达和发挥作用．

解答： 解：（1）④过程时用含有目的基因的水稻胚细胞离体培养成完整的植物体，应用的生物技术主要是植物组织培养．
（2）蛋白质工程指以蛋白质的结构规律及其与生物功能的关系作为基础，通过基因修饰或基因合成，对现有蛋白质进行基因改造，或制造一种新的蛋白质，以满足人类的生产和生活的需要．杀虫基因（crylA）是人们根据几种Bt毒蛋白的分子结构设计并人工合成的，这属于蛋白质工程技术．
（3）根据碱基互补配对原则，可以将限制酶Ⅱ切割DNA分子片段配对成双链分子为

GACGTC

CTGCAG

，则该酶识别的核苷酸序列是GACGTC．
（4）①基因表达载体的组成：目的基因+启动子+终止子+标记基因，人工改造时，要使抗虫基因表达，还应插入启动子和终止子．
②tms和tmr分别编码产物控制合成吲哚乙酸和细胞分裂素．用限制酶Ⅱ处理去除质粒上的tct和tmr（基因），保证T-DNA进入水稻细胞后不会引起细胞的无限分裂和生长；另外，使质粒带有单一限制酶作用位点，有利于目的基因（或外源DNA）准确插入，防止环化现象．③限制酶1没有破坏四环素抗性基因，重组细胞没有失去了抗四环素的功能，也能够抗卡那霉素和新霉素．分别以含四环素和卡那霉素的培养基培养已成功导入抗虫基因的水稻胚细胞，观察到的细胞在含卡那霉素的培养基中不能够生长，而在含四环素的培养基中不能生长．
（5）可以利用个体水平检测“华恢l号”是否具有抗虫性状，如害虫抗性接种实验法．
故答案为：
（1）植物组织培养
（2）蛋白质
（3）GACGTC
（4）①启动子  
②tct和tmr    目的基因（或外源DNA）准确插入
③在含卡那霉素的培养基中不能够生长，而在含四环素的培养基中不能生长
（5）害虫抗性接种实验法

点评：本题考查了基因工程的相关知识，意在考查考生能理解所学知识的要点，把握知识间的内在联系；理论联系实际，综合运用所学知识解决自然界和社会生活中的一些生物学问题的能力和从题目所给的图形中获取有效信息的能力．