(12分)科学家将人的生长激素基因与大肠杆菌的DNA分子进行重组,并成功地在大肠杆菌中得以表达。过程如下图,据图回答:
(1)过程①表示采取 的方法来获取目的基因。
(2)形成图中②含有目的基因的DNA(重组质粒)需要的酶包括: 和 。
(3)基因工程中常用的载体除有质粒外,还有 。重组质粒包括启动子、 、 及终止子等部分。
(4)图中③过程用人工方法,使体外重组的DNA分子转移到受体细胞内,一般将受体大肠杆菌用 处理,使细胞成为 ,从而使含有目的基因的重组质粒容易进入受体细胞。检测大肠杆菌B是否导入了质粒或重组质粒,可采用的方法是将得到的大肠杆菌B涂布在含有 的培养基上,若细菌能够生长,说明:已导入了重组质粒或普通质粒A,理由: 。
(5)基因工程的第四步中,检测目的基因是否插入受体细胞的染色体DNA上、检测目的基因是否翻译成蛋白质,用到的技术分别是 、 。
(1)反转录法 (2)限制性核酸内切酶、DNA连接酶
(3)λ噬菌体的衍生物(动植物病毒) 目的基因 标记基因
(4)氯化钙 感受态细胞 (氨苄)青霉素 普通质粒和重组质粒都含有抗氨苄青霉素的基因
(5)DNA分子杂交技术 抗原-抗体杂交技术
【解析】
试题分析:(1)由RNA来获得DNA用的是反转录法。
(2)运用的工具酶有限制性核酸内切酶和DNA连接酶。
(3)常用的运载体有质粒、动植物病毒、λ噬菌体的衍生物。重组质粒必须包含启动子,终止子,目的基因和标记基因。
(4)用氯化钙处理大肠杆菌细胞可以使其处于感受态状态。因本题上有2个标记基因,但抗四环素基因被插入的基因破坏掉了,因此剩下的是抗氨苄青霉素抗性基因,如果在含氨苄青霉素的培养基上能生长,说明已经导入了重组质粒或普通质粒A,因为普通质粒和重组质粒都含有抗氨苄青霉素的基因。
(5)目的基因检测在DNA水平上可用DNA分子杂交技术,是否翻译成蛋白质用抗原-抗体杂交技术。
考点:本题考查基因工程相关知识,意在考察考生对知识点的掌握及对信息提取分析运用能力。
科目:高中生物 来源: 题型:
科学家将人的生长激素基因与pBR322质粒进行重组,得到的重组质粒导入牛的受精卵,使其发育为转基因牛,再通过细胞工程培育为转基因克隆牛。pBR322质粒含有两个抗生素抗性基因和5个限制酶切点(如图2)。将重组质粒导入大肠杆菌,并成功地在大肠杆菌中得以表达。请据图回答问题。
(1)图1中显示的人的生长激素基因是通过人工合成的,图中①过程需要的酶是________。该过程所依据的碱基互补配对原则是________________(用字母和箭头表示)。
(2)图1中的mRNA是从人体的哪些细胞中获取的?
________________________。
(3)重组质粒形成与否需要鉴定和筛选,方法是将重组质粒的DNA分子导入大肠杆菌,通过含抗生素的培养基进行培养,观察大肠杆菌的生长、繁殖情况进行判断,如图3所示:
①如果受体菌在培养基A上能生长、繁殖形成菌落,而不能在培养基B上生长、繁殖,则使用限制酶a的切点是图2中的________,即目的基因插入了________中。
②如果受体菌在培养基A上不能生长、繁殖形成菌落,而在培养基B上能生长、繁殖,则使用限制酶a的切点是图2中的________,即目的基因插入了________中。
③如果受体菌在培养基A和培养基B上都能生长、繁殖形成菌落,则使用限制酶a的切点是图2中的________。
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科目:高中生物 来源:2010年江苏省江都中学高二第二学期期末考试生物试题 题型:综合题
(8分)科学家将人的生长激素基因与大肠杆菌的DNA分子进行重组,并成功地在大肠杆菌中得以表达。但在进行基因工程的操作过程中,需使用特定的限制酶切割目的基因和质粒,便于重组和筛选。已知限制酶I的识别序列和切点是—G↓GATCC— ,限制酶II的识别序列和切点是—↓GATC—,据图回答:
(1)由上述质粒结构图可知基因工程中的载体至少应具备的条件是
①_________________________________ ,②_________________________________ 。
(2)根据图示分析,在构建基因表达载体过程中,应选用限制酶_________(填“I”或“II”)切割质粒,再用_____________缝合目的基因和质粒之间的缺口,可获得_____种重组质粒。
(3)将得到的大肠杆菌B涂布在一个含有_____________的培养基上,待平板冷凝后为避免污染,需将培养皿呈________状态放置。经过一定时间培养后,能够在培养基上生长的,说明已导入了__________________________,反之则没有导入。
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科目:高中生物 来源:2010-2011学年高考复习单元检测:第五章基因突变和其它变异;第六章从杂交育种到基因工程 题型:选择题
美国科学家将人的生长激素基因转移到了小鼠体内,得到了超级小鼠,此转基因技术的受体细胞是( )
A.卵细胞 B.去核卵细胞
C.受精卵细胞 D.乳腺上皮细胞
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科目:高中生物 来源:2010届山东省淄博市高三一模理综生物 题型:综合题
科学家将人的生长激素基因与质粒重组后,导入牛的受精卵,并成功从牛奶中提取到了人生长激素,操作流程如下图所示,请据图回答。(已知限制酶I的识别序列和切点是-G↓GATCC- ,限制酶II的识别序列和切点是-↓GATC-)。
(1)获取目的基因的主要途径包括从已有物种细胞中提取和____________。
(2)据图分析,在构建重组质粒的过程中,目的基因用________进行了切割。
(3)获能的精子和卵细胞相遇后首先发生______反应,之后精子接触卵黄膜,并进一步与卵结合,在该过程中,____________和____________可以防止其它精子入卵。
(4)图中“受体”是________________________;“符合要求的个体”是指________________________。
(5)将牛受精卵进行人工培养后,一般可选择____________期的、发育良好的胚胎进行移植。
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科目:高中生物 来源:2013届河北省高一第二学期期末考试生物试卷 题型:选择题
美国科学家将人的生长激素基因转移到了小鼠体内,得到了超级小鼠,此转基因技术的受体细胞是( )
A.卵细胞 B.去核卵细胞 C.受精卵细胞 D.乳腺上皮细胞
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